13c ureastest: förberedelser, resultat, positivt, negativt

Sedan upptäckten av Helicobacter pylori-bakterien i samband med kronisk gastrit och magsår och tolvfingertarmsår har diagnostiska metoder utvecklats, inklusive ureastest, vilket gör det möjligt att detektera dessa mikroorganismer hos en specifik patient, bekräfta deras inblandning i utvecklingen av mag-tarmsjukdomar och förskriva effektiv behandling.

Ureasenzym som biomarkör för Helicobacter-infektion

H. pylori-bakterier skyddar sig mot den sura miljön i magsäckens lumen på två sätt. För det första, genom att skada slemhinnan med sina flageller, når mikroorganismerna dess nedre lager, ända ner till epitelcellerna, där pH-värdet är högre (dvs. surhetsgraden är lägre). För det andra neutraliserar bakterierna syran genom att syntetisera stora mängder av det katalytiskt aktiva högmolekylära metalloenzymet ureas eller ureamidohydrolas.

Användningen av ureas vid diagnos av Helicobacter är möjlig inte bara på grund av enzymets cytoplasmatiska aktivitet, utan också på grund av extern interaktion med värdceller.

Under ureasens inverkan sker nedbrytning av magsäcksurea till vätenitrid (ammoniak) och koldioxid (koldioxid). De reagerar med saltsyra i magsaften och skapar en zon med neutral surhet runt H. pylori, och stöder även metabolismen hos bakterieceller.

Det är därför ureas är den viktigaste faktorn i koloniseringen av H. pylori i den mänskliga magslemhinnan, och detektion av ureolytisk aktivitet anses vara en biomarkör för bakteriens virulens, vilket gastroenterologer – genom att utföra ett ureastest – använder för att diagnostisera Helicobacter-infektion, samt för att övervaka resultaten av läkemedelsinducerad destruktion (utrotning) av bakterier.

H. pylori-diagnostik omfattar invasiva och icke-invasiva tester – beroende på om endoskopisk undersökning av magsäcken (fibrogastroduodenoskopi) krävs eller inte. Det invasiva testet är snabbtest för ureas eller expresstest för ureas (RUT-test), vilket kräver att man tar vävnadsprover (biopsi). 13C-urea-utandningstest (13C-UBT) är det vanligaste icke-invasiva testet.

Det bör noteras att icke-invasiv diagnostik av H. pylori kan utföras med hjälp av ett blodprov för antikroppar (specificitet på 75 %, sensitivitet - 84 %), urin-ELISA (med en sensitivitet på 96 % och specificitet på 79 %) och ett koprogram för bakteriella antigener. Mer information - Helicobacter pylori-infektion: antikroppar mot Helicobacter pylori i blodet

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]

Indikationer för förfarandet ureastest

Kolonisering av magslemhinnan av H. pylori är i sig inte en sjukdom; det är en faktor i ökad bakteriebelastning på kroppen, vilket under vissa förhållanden kan utlösa utvecklingen av ett antal patologier i magsäcken och övre mag-tarmkanalen.

Indikationer för diagnostik av Helicobacter-infektion, i synnerhet ureastest, är associerade med gastrit med ökad surhet, antral och atrofisk gastrit, duodenit, magsår och duodenalsår, gastriskt MALT-lymfom. Efter endoskopisk resektion av magcancer i tidigt stadium kan en histologisk undersökning utföras i kombination med ett snabbt ureastest - FGDS med ureastest.

Gastroenterologer kan ordinera ett ureastest om patienter klagar på en känsla av tyngd och obehag i den epigastriska regionen, frekvent halsbränna efter att ha ätit, sur eller rutten rapning, bitterhet i munnen, illamående, tarmproblem, värkande eller krampaktig smärta i magen.

[ 8 ], [ 9 ]

Förberedelse

Förberedelser inför 13C-urea-andningstestet innebär att patienten slutar: ta antibiotika fyra veckor före testet, och NSAID, protonpumpshämmare (som minskar magsyran) och antacida eller adsorbenter som används mot halsbränna – minst två veckor innan. Läkemedelsanvändning bör upphöra fem till sex dagar innan, och alkoholkonsumtion och rökning – tre dagar före testet.

Det rekommenderas också att undvika att äta baljväxter i ungefär en vecka före testet, eftersom bönor, ärtor, linser, sojabönor och lantbönor innehåller ureas (vilket skyddar växter från sjukdomar och skadeinsekter).

Kvällen före testet är en sen, tung middag kontraindicerad; på testdagen bör du utföra normal munhygien, och en och en halv timme före testet bör du inte dricka något eller använda tuggummi.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Teknik ureastest

Implementeringsteknik:

• Först tas ett grundläggande andningsprov - en utandning görs i en mjuk plastbehållare (och hermetiskt försluts);
• vätska med tillsatt 13C-urea tas oralt;
• Efter 25–30 minuter tas ett andra prov av utandningsluften in i en annan behållare.

De prover som erhålls på detta sätt analyseras på en masspektrometer med separation av isotoper i ett andra prov och bestämning av deras koncentration. Skillnaden mellan värdena i det andra och första provet uttrycks som delta (δ) jämfört med baslinjenivån. Normala värden, dvs. negativa värden för den märkta atomen 13C hos icke-infekterade patienter varierar från 0,15-0,46%, och positiva värden i närvaro av infektion är 1,2-9,5% med en ureahydrolyshastighet på mer än 12-14 μg/min.

Enkelt uttryckt: detektionen av 13C-märkt koldioxid i utandningsluften indikerar att urea har hydrolyserats av ureasenzymet H. pylori, vilket i själva verket bekräftar dess närvaro i magsäcken.

H. pylori-andningstest

13C-UBT-testet eller 13C-urea-andningstestet för Helicobacter pylori är en av de viktigaste icke-invasiva metoderna för att upptäcka denna infektion: med 100 % sensitivitet och 98 % specificitet är risken för falskt positiva och falskt negativa resultat jämfört med histologi och blodantikroppstestning 2,3 % lägre.

Analysen är baserad på hydrolys av oralt administrerad flytande urea märkt med en kolatom (stabil icke-radioaktiv isotop) 13C (50–75 mg 13C-urea utspädd i 100 ml vätska) med H. pylori-ureas.

Urea märkt med en isotopindikator genomgår hydrolys i magsäcken med frisättning av ammoniak och koldioxid innehållande märkta atomer, som diffunderar in i blodet och utsöndras från lungorna under andning. Den märkta koldioxiden registreras med en analytisk anordning - en masspektrometer, vars funktion är baserad på icke-dispersiv isotopselektiv spektroskopi, eller en infrarödspektroskopisk analysator.

Snabbt ureastest

Rapid Urease Test (RUT) utförs under endoskopisk undersökning av magsäcken och tolvfingertarmen – med moderna endofibroskop – och samtidig insamling av biopsiprover. Biomaterialet är tänkt att tas från den antrala delen av magsäcken. Därför är fibrogastroduodenoskopi eller FGDS med ureastest en invasiv diagnostisk metod.

Den erhållna biopsin nedsänks helt i ett förberett standardiserat medium innehållande agargel, urea, syra-basindikatorn fenolsulfoftalein och ett bakteriostatiskt medel (tillsatt för att förhindra tillväxt av kontaminerande mikroorganismer och falskt positiva resultat).

Om H. pylori-bakterier finns i magvävnadsprovet kommer det ureas de producerar att hydrolysera urea och höja pH-värdet, vilket syns tydligt när indikatorn ändras från gult till orange (vid pH 6,8) och lila (vid pH > 8). 75 % av positiva tester ändrar färg inom 120–180 minuter, och ju snabbare indikatorn ändrar färg, desto större är antalet bakterier. Men tester som verkar negativa sparas i 24 timmar.

Positivt snabbt ureastest, vad betyder det? Ett positivt RUT-test – indikatorn blir röd – betyder att biopsiprovet som placeras i agarmediet innehåller minst 105 H. pylori-bakterier, även om deras koncentration vanligtvis är högre.

Känsligheten för olika testmodifieringar varierar inom intervallet 90–98 % och specificiteten – 97–99 %.

Som gastroenterologer noterat, om patientens resultat indikerar ett kraftigt positivt ureastest (tre korsningar), betyder detta: pH> 8, och indikatorn ändrade färg på mindre än 60 minuter från det ögonblick då biopsin doppades, vilket indikerar ett stort antal H. pylori och en hög nivå av ureasuttryck. Det ungefärliga antalet bakterier kan räknas under histologisk undersökning av biopsin under ett mikroskop, och om det överstiger 40-50 i det visualiserade området anses infektionsnivån vara hög.

13C-urea-andningstestet ger sällan falskt positiva resultat, och hos patienter med misstänkt magsår eller tolvfingertarmsår anses ett positivt test bekräfta diagnosen, medan ett negativt resultat bör bekräftas med EGD med ureatest.