Mikroskopisk analys av sputum

Mikroskopisk observation av nativa och fasta färgade sputumprov tillåter en detaljerad undersökning av dess cellstruktur, och en viss del återspeglar naturen av den patologiska processen i lungorna och luftrören, dess aktivitet, för att identifiera de olika fibrösa och kristallin bildning, också ha viktigt diagnostiskt värde, och slutligen grovt bedöma villkoret mikrobiell flora i luftvägarna (bakterioskopi).

Vid mikroskopi använd inhemska och målade preparat av ett sputum. För att studera den mikrobiella floran (bakterioskopi) spottas smutsar oftast av Romanovsky-Giemsa, enligt Gram, och för upptäckt av Mycobacterium tuberculosis, men Cilu-Nielsen.

Cellelement och elastiska fibrer

Av de cellulära elementen som kan detekteras i sputum hos patienter med lunginflammation är epitelceller, alveolära makrofager, leukocyter och erytrocyter av diagnostisk betydelse.

Epitelceller. Skivepitel har inte från munnen, nasofarynx, stämbanden och struplocket diagnostiskt värde, även om detekteringen av ett stort antal skivepitelceller, indikerar typiskt en kvalitet sputumprov låg levereras till laboratoriet och saliv som innehåller betydande förorening.

Hos patienter med lunginflammation anses sputum vara lämplig för undersökning om antalet epitelceller inte överstiger 10 i synfältet med en mikroskopi med liten ökning. Ett större antal epitelceller indikerar en oacceptabel dominans av orofaryngealt innehåll i det biologiska provet.

Alveolära makrofager, vilka i små mängder också kan hittas i vilket sputum som helst, är stora celler med retikulohystocytiskt ursprung med en excentriskt lokaliserad stor kärna och rikliga inklusioner i cytoplasman. Dessa inklusioner kan bestå av makrofagabsorberade små dammpartiklar (dammceller), leukocyter och liknande. Antalet alveolära makrofager ökar med inflammatoriska processer i pulmonal parenkym och luftvägar, inklusive lunginflammation.

Celler cylindriska epitel försett med cilier foder slemhinnan i struphuvudet, luftstrupen och luftrören. De ser ut som långsträckta celler, utökad i ena änden, där kärnan och ciliärerna är belägna. Celler cylindriska epitel försett med cilier finns i någon sputum, men deras ökning indikerar skador bronkial slemhinnan och luftstrupe (akut och kronisk bronkit, bronkiektasi, trakeit, laryngit).

Leukocyter i små mängder (2-5 i synfältet) finns i vilket sputum som helst. När inflammation i lungvävnaden eller bronkial slemhinna och luftstrupen, speciellt vid suppuration (gangrän, lungabscess, bronkiektas), ökar deras antal avsevärt.

Vid färgning av sputumpreparat enligt Romanovsky-Giemsa är det möjligt att differentiera enskilda leukocyter, som ibland har ett viktigt diagnostiskt värde. Sålunda, när den uttrycks pulmonell inflammation eller bronkiala slemhinnan vävnad ökar när det totala antalet neutrofiler och antalet degenerativa former av fragmentering av kärnor, och förstörelsen av cytoplasman.

En ökning av antalet degenerativa former av leukocyter är det viktigaste tecknet på aktiviteten hos den inflammatoriska processen och sjukdoms svårare sjukdom.

Erytrocyter. Enkla erytrocyter kan detekteras praktiskt taget och eventuellt sputum. En signifikant ökning observeras när vaskulär permeabilitet försämras hos patienter med lunginflammation, med förstöring av lung- eller bronkialvävnad, stagnation i en liten cirkelcirkulation, lunginfarkt etc. I ett stort antal röda blodkroppar i sputum finns under hemoptys av vilken genes som helst.

Elastiska fibrer. Ett ytterligare element av sputumplastfiber som uppträder i sputum när destruktion av lungvävnad (lungabscess, tuberkulos, sönderfallande lungcancer etc.) bör också nämnas. Elastiska fibrer presenteras i sputum i form av tunna tvåkontur, krympade filament med dikotom uppdelning vid ändarna. Utseendet av elastiska fibrer i sputum hos patienter med svår lunginflammation indikerar förekomst av en av komplikationerna av sjukdomen - abscessering av lungvävnad. I vissa fall kan vid bildandet av lungabscess elastiska fibrer i sputum detekteras även något tidigare än motsvarande radiografiska förändringar.

Ofta kan tunna fibrinfibrer detekteras med kronisk lunginflammation, tuberkulos, aktinomycos, fibrinös bronkit i sputumpreparat.

Tecken på en aktiv inflammatorisk process i lungorna är:

1. Sputumets natur (mucopurulent eller purulent)
2. en ökning av antalet neutrofiler i sputum, inklusive deras degenerativa former;
3. en ökning av antalet alveolära makrofager (från enskilda kluster av flera celler i synfältet och mer);

Utseendet i sputum av elastiska fibrer indikerar förstörelsen av lungvävnad och bildandet av lungabscess.

De slutliga slutsatserna om närvaron och graden av aktivitet av inflammation och förstöring av lungvävnad bildas först när de jämförs med den kliniska bilden av sjukdomen och resultaten av andra laboratorie- och instrumentella undersökningsmetoder.

[1], [2], [3], [4], [5]

Mikrobiell flora

Smörjmikroskopi, färgad enligt gram, och studien av mikrobiell flora (bakterioskopi) hos en del av lunginflammationstillstånd gör det möjligt att preliminärt fastställa det mest sannolika orsaksmedlet för lunginfektion. Denna enkla metod för att diagnostisera patogenen är inte tillräckligt noggrann och bör endast användas i kombination med andra (mikrobiologiska, immunologiska) metoder för sputumundersökning. Immersionsmikroskopi av färgade utstrykningar är ibland mycket användbar för akut urval och administrering av adekvat antibiotikabehandling. Man bör emellertid komma ihåg möjligheten att förorena bronkialinnehållet i mikrofloran i övre luftvägarna och munhålan, speciellt när sputuminsamlingen är inkorrekt.

Sputum anses därför lämpligt för vidare undersökning (bakterioskopi och mikrobiologisk undersökning) endast om den uppfyller följande villkor:

• Gramfärgning i sputum avslöjar ett stort antal neutrofiler (mer än 25 i synfältet med en liten förstoring av mikroskopet);
• Antalet epitelceller, mer karakteristiska för innehållet i orofarynxen, överskrider inte 10;
• i beredningen finns en övervägande av mikroorganismer av samma morfologiska typ.

På gramfärgning av sputum i ett cellprov ibland vara tillräckligt för att identifiera gram pneumokocker, streptokocker, stafylokocker och gramnegativa bakterier gruppen bra -. Klebsiellu, wand Pfeiffer, E. Coli och andra grampositiva bakterier I det här fallet blir blå, och Gram - rött.

Bakteriella patogener av lunginflammation

Grampositiva	Gram
Pneumococcus Streptococcus pneumoniae. Streptokokki Streptococcus pyogenes, Streptococcus viridans. stafylokocker: Staphylococcus aureus, Staphylococcus hemolyticus.	Knappar  (Klebsiella pneumoniae) Hemophilus influenzae (Pfeiffer) Haemophilius influenzae Pseudomonas aeruginosa  (Pseudomonas aeruginosa) Legionella (Legionella Pneumophilia) E. Coli (Escherichia coli)

Pre sputum smear är det enklaste sättet att lunginflammation patogener verifiering och har en bestämd värde för valet av den optimala antibiotikabehandling. Till exempel, när detektering utstryk färgade med Gram, grompolozhitelnyh diplokocker (pneumokocker) eller stafylokocker i stället för bredspektrumantibiotika, som ökar risken för selektion och förökning av mikroorganismer aitibiotikorezistentnyh möjligt att tilldela riktad terapi, aktiva mot stafylokocker eller pneumokocker. I andra fall, kan detektion av de dominerande floran i de Gram utstryk indikerar pas som orsakar lunginflammation Enterobacteriaceae är gramnegativa (Klebsiella, E. Coli, osv), som kräver en motsvarande destination målriktad behandling.

Emellertid, kan den preliminära slutsatsen av den troliga orsakande medlet för lunginfektion genom mikroskopi göras endast baserade pas signifikant ökning av bakterier i sputum, i en koncentration av 10 ^sex - tio ⁷  mikrobiella celler / ml eller mer (LL Vishnjakova). Låga koncentrationer av mikroorganismer (<10 ³  m.ks / ml) är karakteristiska för den åtföljande mikrofloran. Om koncentrationen av mikrobiella kroppar varierar från 10 ⁴  till 10 ⁶  m.ks / ml, utesluter detta inte den etiologiska rollen för denna mikroorganism vid förekomst av lunginfektion, men bevisar inte det.

Det bör också komma ihåg att "atypiska" intracellulära patogener (mykoplasma,  legionella, klamydia, rickettsia) inte fläckar Gramm. I dessa fall kan misstankar om att ha en "atypisk" infektion uppträda om smuts visar en dissociation mellan ett stort antal neutrofiler och ett extremt litet antal mikrobiella celler.

Tyvärr är metoden för bakterioskopi generellt ganska låg i känslighet och specificitet. Inte förutsägbart värde, även för väl visualiserade pneumokocker, når knappt 50%. Detta innebär att i halva fallen ger metoden falska positiva resultat. Detta beror på flera orsaker, varav en är det faktum att ca 1/3 av patienterna innan sjukhusvistelse har fått antibiotika, vilket kraftigt minskar effekten av slem cellprov. Även i fallet med positiva resultaten av studien, vilket tyder på en tillräckligt hög koncentration i smear "typiska" bakteriella patogener (t ex pneumokocker), kan inte fullständigt utesluta förekomsten av saminfektion "atypiska" intracellulära patogener (mykoplasma, Klamydia, Legionella).

Metoden för bakterioskopi av sputumutstryk, färgad av Gram, hjälper i vissa fall till att verifiera orsakssystemet för lunginflammation, även om det i allmänhet har mycket lågt prediktivt värde. Atypiska intracellulära patogener (mykoplasma, legionella, klamydia, rickettsia) kontrolleras inte alls genom metoden för bakterioskopi, eftersom de inte fläckar Gramm.

Det bör nämnas möjligheten till mikroskopisk diagnos hos patienter med lunginflammation av svamplunginfektion. De mest relevanta för patienter som får långvarig behandling med bredspektrumantibiotika, är detekteringen av nativa eller mikroskopi av färgade sputum Candida albicans i form av jästceller och förgrening av myceliet. De indikerar en förändring i mikrofloraen av det trakeobronchiala innehållet, vilket sker under påverkan av antibiotikabehandling, vilket kräver en väsentlig korrigering av terapin.

I vissa fall hos patienter med lunginflammation är det nödvändigt att skilja den befintliga lungsjukdomen med tuberkulos. För detta ändamål använder en färg smear Ziehl-Nielsen, som i vissa fall gör det möjligt att identifiera Mycobacterium tuberculosis, men ett negativt resultat av en sådan undersökning betyder inte brist på tbc-patienter. Vid färgning av sputum enligt Tsil-Nielsen är mycobacterium tuberculosis röd, och alla andra sputumelement är blåa. Tuberkulösa mykobakterier har utseende av avföring, raka eller svagt böjda pinnar av olika längder med separata förtjockningar. De ligger i förberedelsen i grupper eller ensam. Diagnostiskt värde är detektionen vid framställning av jämn enkel mykobakterie tuberkulos.

För att öka effektiviteten av mikroskopisk detektion av mykobakterier tuberkulos använda ett antal ytterligare metoder. Den vanligaste av dessa är den så kallade flotationsmetoden, där homogeniserat sputum skakas med toluen, xylen eller bensin, där dropparna dyker upp och fångar mykobakterier. Efter upplösning av sputum pipetteras toppskiktet på glidbanan. Därefter är läkemedlet fixerat och färgat av Tsilyu-Nielsen. Det finns andra metoder för ackumulering (elektrofores) och mikroskopi av tuberkulosebakterier (luminescensmikroskopi).

Mikroskopisk undersökning (analys) av sputum kan upptäcka slem, cellulära element, fibrösa och kristallina formationer, svampar, bakterier och parasiter.

celler

• Alveolära makrofager är celler med retikulogistocyt ursprung. Ett stort antal makrofager i sputum detekteras i kroniska processer och vid upplösning av akuta processer i bronkopulmonärt system. Alveolära makrofager innehållande hemosiderin ("celler med hjärtfel") upptäcks med mild infarkt, blödning, stagnation i en liten cirkelcirkulation. Makrofager med lipiddroppar är ett tecken på obstruktiv process i bronkierna och bronkiolen.
• Xantomceller (feta makrofager) finns i abscess, aktinomycos, echinokocker i lungorna.
• Celler i det cylindriska cilierade epitelet är celler i larynx slemhinnan, luftstrupen och bronkierna; de finns i bronkit, trakeit, bronkial astma, maligna neoplasmer i lungorna.
• Det platta epitelet detekteras när spytt kommer in i sputumet, det har ingen diagnostisk betydelse.
• Leukocyter i en eller annan mängd är närvarande i vilket sputum som helst. Ett stort antal neutrofiler detekteras i mukopurulent och purulent sputum. Eosinofiler är rika på sputum i bronkial astma, eosinofil lunginflammation, glottis lungskador och lunginfarkt. Eosinofiler kan förekomma i sputum för tuberkulos och lungcancer. Lymfocyter i stort antal finns i kikhosta och i sällsynta fall med tuberkulos.
• Erytrocyter. Detektion av enskilda röda blodkroppar i sputum är inte av diagnostisk betydelse. Om färskt blod är närvarande i sputum bestäms oförändrade erytrocyter, men om blodet som har varit i andningsvägarna under lång tid lämnar med sputum, hittas lekade röda blodkroppar.
• Celler av maligna tumörer finns i maligna neoplasmer.

fibrer

• Elastiska fibrer uppträder i förfall av lungvävnad, som åtföljs av förstörelsen av epitelskiktet och frisättningen av elastiska fibrer; de finns i tuberkulos, abscess, echinokocker, neoplasmer i lungorna.
• Koronfibrer detekteras i kroniska lungsjukdomar, såsom cavernös tuberkulos.
• Kalcerade elastiska fibrer är elastiska fibrer impregnerade med kalciumsalter. Detektion av dem i sputum är karakteristisk för nedbrytningen av tuberkulär petrichit.

Spiraler, kristaller

• Kurshman spiraler bildas i bronkiets spastiska tillstånd och närvaron av slem i dem. Under en hoststryk frigörs viskös slem i lumen av en större bronkus, som vrids i en spiral. Kurshman spiraler uppträder med bronkial astma, bronkit, lungtumörer, komprimerande bronkier.
• Charcot-Leiden-kristallerna är produkterna av sönderfall av eosinofiler. Vanligtvis förekommer i ett sputum innehållande eosinofiler; är karakteristiska för bronkial astma, allergiska tillstånd, eosinofila infiltreringar i lungorna, lungfläckor.
• Kolesterolkristaller förekommer med abscess, lungekookokos, neoplasmer i lungorna.
• Kristaller av hematoidin är karakteristiska för lungens abscess och gangren.
• Drusor av aktinomycete detekteras i lungernas aktinomykos.
• Echinokocker utgörs av echinokocker i lungorna.
• Korkar Dietrich - klumpar av en gulaktig grå färg, med en obehaglig lukt. De består av detritus, bakterier, fettsyror, droppar av fett. De är typiska för en abscess av lung och bronkiektas.
• Ehrlichs tetrad består av fyra element: kalcifierat detritus, förkalkade elastiska fibrer, kolesterolkristaller och mycobacterium tuberkulos. Visas i förfall av det förkalkade primära tuberkulära fokuset.

Mycelium och spirande svampceller uppträder i svamplempelser i bronkopulmonärt system.

Pneumocystis uppträder med pneumocystis lunginflammation.

Svampar sfärer detekteras i lungens koccidioidomycos.

Askorl larverna detekteras med ascariasis.

Larver i tarmens ugristic identifieras med starkyloidiasis.

Ägg i lungflukten identifieras med paragonimos.

Element som finns i sputum i bronchial astma. När bronkial astma vanligtvis separeras av en liten mängd slemhinnan, viskös sputum. Makroskopiskt kan du se Kurshman-spiralen. När mikroskopisk forskning är karakteristisk för närvaron av eosinofiler, cylindriska epitel, finns det kristaller av Charcot-Leiden.