Vitamin A i blodet

Referensvärdena (norm) för koncentrationen av vitamin A (retinol) i blodserum: hos barn 1-6 år - 0,7-1,5 μmol / l, 7-12 år - 0,91-1,71 μmol / l, 13 -19 år - 0,91-2,51 μmol / 1; hos vuxna är det 1,05-2,09 μmol / l.

Vitamin A hänför sig till fettlösliga och finns i två former - den faktiska vitamin A eller retinol (som bara finns i animaliska produkter) och pro-vitamin A, känd som karoten (framställd från animaliskt eller vegetabiliskt ursprung), som kan omvandlas till retinol i väggarna matsmältningskanalen. Cirka 50-90% av retinol inkommande livsmedel absorberas i tunntarmen och transporteras i chylomikroner associerade med komplexet till levern, där den lagras i form av retinol-palmitat. Om så är nödvändigt släpps det in i blodomloppet i form av retinol, vilket är i kombination med vitamin A-bindande protein. I serum binds vitamin A-bindande protein + retinolkomplexet till transthyretin. Från serum fångas retinol av målceller, såsom retinala fotoreceptorer och epitel.

När vitamin A går in i kroppen överstigande krav (180-430 μg retinol per dag beroende på ålder, kön och fysiologiskt tillstånd), överstiger dess överskott i levern som bildar depotet på detta vitamin. Med minskat intag av retinol från mat släpps dess leverbutiker i blodet, varvid retinolkoncentrationen i serum hålls på en normal nivå (över 0,7 μmol / L). Andra biologiskt aktiva former av vitamin A (retinal och retinsyra) finns i blodet i mycket låga koncentrationer (under 0,35 μmol / L); på estrarna av retinol står för cirka 5% av det totala vitaminet A (0,1-0,1 μmol / l).

Vitamin A har en viktig roll vid oxidationsreduceringsprocesser. Retinol främjar bildandet av glykogen i levern och musklerna, främjar ökningen av kolesterol i blodet, deltar i syntesen av steroid- och könshormoner. Det krävs för tillväxt och bildning av ben skelett återsyntes av rhodopsin, och bidrar även till den normala funktionen av slemhinnor och epitel av huden locket, förhindrar dess metaplasi, hyperkeratos och överdriven sårskorpa. Vitamin A hjälper till att stärka hår, tänder och tandkött. Under de senaste åren, visar det omväxlande roll av vitamin A i förhindrandet av cancer och regleringen av immunitet (väsentliga för fullbordandet av fagocytos, öka syntesen av Ig, stimulerar produktionen av mördar-T-celler, stimulerar typ T-hjälpar II et al.). Vitamin A - En aktiv antioxidant, som huvudsakligen verkar i närvaro av E-vitamin. Det skyddar vitamin C från oxidation. Brist på vitamin A betraktas som en riskfaktor för maligna neoplasmer. I försöksstudier visades att en ökning av vitamin A-innehållet i kosten ökar median livslängden med 17,5%. Zink är en nödvändig kofaktor för vitamin A-metabolism (nödvändig för syntes av vitamin A-bindande protein).

Den genomsnittliga dagliga behovet av retinol vuxna (20-50 år) var 1,2 mg (4,000 lU, är en lU motsvarar 0,3 mikrogram retinol) för gravida kvinnor - 1,5 mg (5000 lU) för amning - 1, 8 mg (6000 IE), för personer över 60 år - 2,5 mg (10 000 IE). Minst en tredjedel av det dagliga kravet på retinol ska levereras till kroppen i färdig form. Resten kan absorberas genom användning av karotenoider, av vilka retinol bildas i kroppen. Man bör komma ihåg att cirka 30% retinol i livsmedel förstörs genom värmebehandling. Aktiviteten av retinol är 2 gånger högre än karoten, dessutom är den senare endast 30-40% absorberad i tarmarna. Vid bedömningen av kostintaget anses därför att 1 mg retinol ungefär motsvarar 6 mg karotenoider.

Bestämning av retinol (vitamin A) och karotenoider i serum enligt Bessey modifiering LA Anisimova

Metodsprincipen

Bestämningen av vitamin A och karotenoider baseras på deras hydrolys i en alkalisk alkohollösning, följt av extraktion med en blandning av organiska lösningsmedel.

Reagens

• 11 M lösning av kaliumhydroxid (KOH).
• 96% etylalkohol.
• 1 M lösning av kaliumhydroxid (KOH) i 96% etylalkohol: 1 volym 11 M KOH-lösning blandas med 10 volymer 96% etylalkohol. Reagenset framställes på dagen för studien. Om färgning uppstår vid blandning måste alkoholen rengöras genom destillation före användning.
• Xylol, hk.
• Oktan, h.ch.
• Xylenoktanblandning: framställd genom att blanda lika volymer xylen och oktan.

Undersökningarna utförs på en spektrofotometer.

Förloppet för bestämning av vitamin A

Blod som tagits från fingret (ca 1 ml) sättes till centrifugetiketten och placeras i en glaskopp med varmt vatten (temperatur 40-45 ° C) i 20-30 minuter. För att separera serumet lindas blodproppen försiktigt runt rörets kant med en tunn glasstång och centrifugeras vid 3000 rpm i 10 minuter.

Välj 0,12 ml serum och överför det till ett agglutineringsrör, tillsätt sedan 0,12 ml av en 1 M alkoholkaliumhydroxidlösning. Innehållet skakas noggrant.

Provrör med prober placeras i ett vattenbad i 20 minuter vid en temperatur av 60 ° C för hydrolys.

Proverna kyles och 0,12 ml av en xylenoktanblandning sättes till dem, skakas kraftigt under 10-15 sekunder. Kyl igen och centrifugera.

Ta försiktigt bort toppskiktet innehållande vitamin A och karotenoider med en Pasteur pipette med en gummikanna och överför den till mikrokuvetter.

Proverna är spektrofotometriska vid en våglängd av 328 nm - för att bestämma vitamin A och vid en våglängd av 460 nm - för bestämning av karotenoider.

Efter spektrofotometri det studerade provet utsätts för ultraviolett strålning för destruktion av vitamin A. För detta ändamål på ett avstånd av 15-20 cm från kvarts mikrokuvetter in (baktericid) lampan så att bestrålningen exponerade delen av kuvetten, fylld med vätska; bestrålningstiden är 45-60 minuter.

Proverna är upprepade gånger spektrofotometriska vid en våglängd av 328 nm. Innehållet av vitamin A bestäms av skillnaden i extinktionsvärden (optisk densitet), med hänsyn tagen till koefficienten (faktor) 637, beräknad av Bessey för vitamin A.

Beräkningen utförs enligt följande formel:

X = 637 × (Е328 (1) - Е328 (2)),

Där X är vitamin A-innehållet, μg / dL; 637 är koefficienten beräknad av Bessey för bestämning av vitamin A; Е328 (1) - lösningens optiska densitet före bestrålning E328 (2) är den optiska densiteten hos lösningen efter bestrålning.

Koefficienten för överföring av koncentrationen av vitamin A från μg / dL i μmol / l är 0,035.

Innehållet av karotenoider beräknas med formeln:

X = 480-Е480,

Där X är innehållet av karotenoider, μg / dL; 480 är koefficienten beräknad av Bessey för att bestämma karotenoider; E480 är den optiska densiteten hos testlösningen.

Anmärkning

Enligt Bessey kan större eller mindre serumvolymer tas under studierna, men dess förhållande till volymen av alkohollösningen bör vara konstant med någon förändring i volymen (mängd) av xylenoktanblandningen.

Normen i innehållet av A-vitamin i blodserumet är: hos nyfödda och spädbarn - 160-270 μg / l; hos vuxna, 1,05-2,45 μmol / l (300-700 μg / l). Innehållet av karotenoider i vuxna serum är 800-2300 μg / l.