Mikrobiologisk undersökning av sputum

Mikrobiologisk undersökning är den viktigaste länken i diagnostisk sökning och verifiering av det orsakande medlet för lunginflammation. Det innebär inte bara att isolera det orsakande medlet, utan också att studera dess egenskaper, inklusive känslighet för olika läkemedel med bakteriedödande och bakteriostatisk verkan.

För detta ändamål används metoden för sputumsådd på olika näringsmedier. I ett sputumprov som levereras till laboratoriet väljs variga klumpar ut och tvättas noggrant i en petriskål med en isotoplösning av natriumklorid, vilket i viss mån gör att de kan befrias från mikrofloran i de övre luftvägarna. Sådden av variga klumpar av sputum utförs på olika näringsmedier, vars sammansättning beskrivs i speciella manualer om mikrobiologi. Medierna med sådderna inkuberas vid 37,5 °C i 24 timmar. Rena kulturer isoleras från de odlade kolonierna, de identifieras med kända mikrobiologiska metoder och deras känslighet för antibiotika bestäms.

För att bestämma den kvantitativa halten av mikroorganismer homogeniseras sputumet, blandas med näringsbuljong, och successiva tiofaldiga utspädningar framställs från blandningen, vilka inokuleras på petriskålar med blodagar. Efter 24 timmars inkubation vid 37,5 °C beaktas resultaten, kolonier av samma typ i utseende räknas och materialets utspädningsgrad beaktas. Utstryk framställs från kolonierna och undersöks i mikroskop.

Tolkning av resultaten

Tolkning av resultaten av mikrobiologisk undersökning av sputum är ganska komplex, vilket förklaras av ett antal faktorer. Ovan har redan nämnts den konstanta växlingen av bronkialinnehåll med mikrofloran i övre luftvägarna och munhålan och den frekventa förekomsten i det normala trakeobronkiala innehållet hos friska personer av de flesta av de mest typiska orsakande agensen för luftvägssjukdomar (pneumokocker, streptokocker, stafylokocker, etc.). I detta avseende gör isoleringen i sputum under mikrobiologiska studier av en association av olika mikroorganismer, varav de flesta i detta specifika fall är opportunistiska, det extremt svårt att fastställa sjukdomens orsakande agens. För att tolka resultaten av mikrobiologisk undersökning av sputum är det därför nödvändigt att ta hänsyn till den kvantitativa dominansen av en viss typ av bakterier (mer än 10 ⁶ -10 ⁷ mc/ml), förekomsten av vissa mikroorganismer i exacerbationsfasen och deras försvinnande under remissionsperioden. Det är mycket viktigt att ta hänsyn till sjukdomens kliniska bild.

De huvudsakliga och möjliga orsaksmedlen till olika kliniska former av lunginflammation

Klinisk form av lunginflammation	Huvudsakliga patogener	Möjliga patogener
Kropps	Pneumokocker	Streptokocker, Klebsiella
Postinfluensa	Stafylokocker, pneumokocker, klebsiella	Haemophilus influenzae, streptokocker
Abscessing	Stafylokocker, bakteroider, blandad flora	Klebsiella, Pseudomonas aeruginosa
Strävan	Bacteroides, anaeroba streptokocker	Stafylokocker, pneumokocker
Postoperativ	Stafylokocker	Pneumokocker, Klebsiella
Interstitial	Mykoplasmer	Patogener av ornitos, psittacosis
Sekundär lunginflammation hos sjukhuspatienter utan tidigare antibakteriell behandling	Stafylokocker, pneumokocker, klebsiella, bakteroider	Escherichia coli, serratia, etc.
Sekundär lunginflammation utvecklades mot bakgrund av antibakteriell behandling	Fakultativa patogena mikroorganismer	Pseudomonas, Serratia, Klebsiella, Staphylococcus, Proteus, etc.
Hos patienter med kronisk bronkit	Pneumokocker, Haemophilus influenzae	Stafylokocker, streptokocker
Hos patienter med alkoholism	Pneumokocker, Haemophilus influenzae, Klebsiella	E. coli, protozoer
Vid förvärvat immunbristsyndrom	Pneumocystis, svampar	Cytomegalovirus
Hos patienter vars vård ges av utomstående	Pneumokocker, stafylokocker, hemofila papiller	Klebsiella, Escherichia coli

Vid kvantitativ bedömning av resultaten av studien av mikrobiell kontaminering hos patienter med lunginflammation är det nödvändigt att komma ihåg den extremt höga känsligheten hos denna indikator för förskrivning av antibiotika. Även kortvarig behandling med antibakteriella läkemedel kan leda till en kraftig minskning av mikrobiell kontaminering, vilket inte möjliggör en adekvat bedömning av resultaten av sputumstudien. Därför är det lämpligt att samla sputum innan antibiotikabehandling förskrivs.

Det bör också noteras att speciella selektiva näringsmedier används för att odla intracellulära patogener av lunginflammation (mykoplasma, legionella, klamydia, rickettsia). Rutinmässig mikrobiologisk testning med konventionella näringsmedier (agar-agar) ger aldrig positiva resultat. Därför bör valet av specifika metoder för mikrobiologisk testning göras med deltagande av den behandlande läkaren, som är skyldig att informera laboratorieläkaren om sina misstankar angående den möjliga rollen av intracellulära patogener i uppkomsten av lunginflammation hos denna patient.

Det bör tilläggas att i verklig klinisk praxis tillåter även en tekniskt perfekt mikrobiologisk undersökning av sputum identifiering av patogenen i högst 40–60 % av fallen. Därför kan andra moderna forskningsmetoder användas för att verifiera patogenen. Informationsinnehållet i en bakteriologisk studie kan ökas avsevärt genom att använda trakeobronkial aspirat, vätska som erhålls under bronkoalveolär lavage (BAL), bronkoskopi etc., snarare än sputum, som det biologiska material som studeras.

Dessutom kan metoden med immunofluorescens av olika biologiska material (bronkoskopimaterial, blod, pleurainnehåll etc.), PCR-diagnosmetoder och studier av nivån av specifika antikroppar i blodserum användas för att identifiera pneumonipatogener. Tyvärr har dessa diagnostiska metoder ännu inte funnit bred klinisk tillämpning och används för närvarande endast i stora specialiserade centra och laboratorier.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]