Hepatit B -virus

Hepatit B är en infektionssjukdom hos en person som kännetecknas av selektiv skada av levern av ett virus. Denna form av hepatit är den farligaste i följderna bland alla kända former av viral hepatit. Dess orsaksmedel är hepatit B-viruset (HBV).

Första antigen av hepatit B-virus har detekterats B. Blumberg i 1964 i serum australiska aborigine, och patogenen hittades i 1970, D. Dane (et al.), Och fick namnet på Dane-partiklar, eftersom det inte fanns någon säkerhet att , att detta verkligen är ett virus, inte dess komponenter. Därefter försvann all tvivel, eftersom i DNA-partiklarna erhölls genomiskt DNA och ett virus-DNA-beroende DNA-polymeras. Virionen innehåller tre huvudantigener, för vilka följande beteckningar introducerades 1974:

• HBsAg är ett ytligt eller lösligt eller australiskt antigen.
• HBcAg är ett kärnantigen (samantigen).
• HBeAg - e-antigen, är lokaliserad i kärnan av virionen och, till skillnad HBcAg, är inte bara närvarande i virionen, men också cirkulerar i blodet i en fri form eller som ett komplex med anti-HBeAg. Det utsöndras i blodet från hepatocyterna med aktiv replikation av HBV.

Ytenantigenet - HBsAg - finns i form av tre morfologiskt olika varianter: 1) representerar superkapsiden av hela virionen; 2) i stora mängder förekommer i form av partiklar med en diameter av 20 nm med en sfärisk form; 3) i form av filament med en längd av 230 nm. Kemiskt är de identiska. Kompositionen har en total HBsAg-antigen och två par av inbördes exklusiva typspecifika determinanter: d / y och w / r, så det finns fyra stora subtyp HBsAg (och således HBV): adw, adr, ayw och aur. Antigen a åstadkommer bildandet av en gemensam korsimmunitet mot alla subtyper av viruset.

Faktiskt har virionen, Dain-partikeln, en sfärisk form och en diameter av 42 nm. Virionens superkapsel består av tre proteiner: huvud (huvud), stor och medium. Genomet är inneslutet i en kapsid och representeras av ett dubbelsträngt ringformigt DNA med en massa av 1,6 MD. DNA: n består av cirka 3200 nukleotider, men dess "plus" -non är 20-50% kortare än minustecknet. Med 5'-änden av den långa filamenten är det virusspecifika proteinet kovalent bunden. 5'-ändarna av båda strängarna är komplementära och bildar "klibbiga" sekvenser 300 nukleotider i längd så att filamenten är stängda i ringen. Innehållet av G + C i virion-DNA är 48-49 mol%. I kärnan av virionen finns förutom DNA-DNA-beroende DNA-polymeras genom DNA-polymeras. "Minus" -defin-DNA av HBV innehåller bara fyra gener (S, C, P och X), men de är organiserade mycket kompakt. Generna S, C, P, X överlappar starkt och kontrollerar syntesen av följande produkter. Gene S-koder för syntesen av huvudbeläggningsproteinet och innehåller all information om ytantigenet av HBsAg. Dessutom kodar den för syntesen av medelstora och stora kuvertproteiner. Proteiner innehåller en gemensam COOH-terminal, men deras översättning börjar med tre olika initiatorkodoner. Gene C koder för syntesen av kapsidproteiner (HBcAg och HBeAg); även om dessa proteiner är kodade av en enda gen, är deras translations sätt olika. Gene P är den största. Den innehåller en del av alla tre andra gener och kodar de enzymer som är nödvändiga för replikation av viruset. I synnerhet kodar den för det omvända transkriptaset, domänen för enzymet RNA-ase H, det 5'-terminala proteinet i "minus" -kedjan. Gene X-koder för proteiner som reglerar uttrycket (expression) för alla virusgener, i synnerhet ett protein med en massa av 17 kD, som är en gentransskriptionstransaktivator.

Proteiner som bildar ett ytantigen finns i glykosylerad (gp) och icke-glykosylerad form. Glykosylerade är gp27, gp33, gp36 och gp42 (siffrorna betecknas med m i kD). Supercapsid HBV består av det huvudsakliga eller grundläggande S-proteinet (92%); medelhalt M-protein (4%) och stort eller långt L-protein (1%).

• Huvudproteinet, p24 / gp27 eller huvudproteinet (protein S) är huvudkomponenten i HBV-kuvertet. I frånvaro av andra skalproteiner polymeriseras och bildas sfäriska partiklar med en diameter av 20 nm, vilka består av 100 polypeptidmolekyler.
• Ett stort protein, p39 / gp42 eller ett långt protein (L-protein) är närvarande i alla tre formerna av HBsAg. Det spelar en viktig roll i morfogenesen av virioner och i deras utgång från cellen. L-proteinet innehåller sekvensen av M-proteinet, som kompletteras genom N-ändsekvenser av 108 (ayw), eller 119 (adw, adr, ayr) aminosyrarester kodade npe-Sl-S-gen-regionen.
• Mittenproteinet - gp33 / gp36, eller proteinet M, är också närvarande i alla tre morfologiska formerna av HBsAg. Proteinet M innehåller vid N-änden en region av 55 aminosyrarester kodade av S-genens före 52-region. Det antas att denna webbplats spelar en viktig roll vid erkännandet av hepatit B-virus av leverceller i ett begränsat värdområde (human, chimpanseeapa). Proteinsekvenserna kodade av S-gen npe-S-regionerna har hög immunogenicitet och deras determinanter ligger på ytan av virionen. Antikroppar mot dessa antigener spelar därför en viktig roll vid framställning av immunitet mot hepatit B.

Syntes av virusproteiner styrs tätt vid graden av transkription och translation. I transkriptionen av virusgenomet syntetiseras två typer av mRNA:

• en mindre - 2100 nukleotider - kodar membranets huvud- och mittproteiner;
• stora - 3500 nukleotider, dvs längre än genomiskt DNA i sig; den innehåller terminala upprepningar med en längd av 100 nukleotider.

Denna typ av mRNA kodar för kapsidproteinet och produkterna av P-genen. Det är också en mall för viral DNA-replikation. Som en del av genomet finns förstärkare (transkriptionsförstärkare) - reglerande element som aktiverar uttrycket av alla virala gener och verkar främst i levercellerna. Särskilt uttrycks gen S på en mycket hög nivå endast i levercellerna och under påverkan av steroidhormoner. Denna omständighet förklarar varför kronisk hepatit B och levercancer (hepatom) observeras hos män oftare än hos kvinnor som har en lägre nivå av steroidhormoner.

Andra reglerande element i hepatit B-viruset modulerar (kontrollerar) syntesnivåerna av enskilda proteiner. Exempelvis syntetiseras ett stort protein endast i små mängder. Det mesta av det på infektionsvirusens yta. Och huvudproteinet och i mindre utsträckning syntetiseras mittenproteinet i stora mängder och lämnar cellerna i ytantigenpartiklarna, vilka i serum innehåller många gånger mer än de mogna virionerna. Antalet ytantigenpartiklar kan vara 1011 -1013 per 1 ml blod (flera hundra μg).

Hepatit B-viruset isoleras i en ny virusgrupp - Hepadnaviridae, släktet Orthohepadnavirus. Liknande hepadnavirus hittades i olika djur (jordproteiner, marmoter, chipmunks, Peking ducks).

Reproduktion av hepadnavirus sker på ett ovanligt sätt. I synnerhet sker replikationen av genomiskt DNA genom mellanliggande länk-RNA, dvs med mekanismen för omvänt transkription.

Livscykeln för hepatit B-viruset.

• Adsorption på cellen.
• Penetrering in i cellen via receptormedierad endocytos mekanism (gränsade pit -> gränsar vial -> lysosom -> nukleokapsid avsluta och inträde av det virala genomet in i hepatocyt kärna).
• Intracellulär reproduktion.

Under penetrationen i cellen förlänger den korta ("plus") DNA-kedjan (kompletterar). Kärncellen DNA-beroende RNA-polymeraset syntetiserar RNA storlek av 3500 nukleotider (pregenom) mRNA och mindre i storlek, för syntesen av virusproteiner. Därefter förpackas pregenet och det virala DNA-polymeraset i en nyssyntetiserad kapsid, vilken överförs till cytoplasman. Här uppträder omvänd transkription av pregenom. Det syntetiserar ett nytt "minus" -defin-DNA. Efter att syntesen av minus-DNA är fullbordad förstörs det pregenomiska RNA. Virion-DNA-polymeraset på "minus" -kedjan syntetiserar en "plus" -kedja. Viralt DNA, som nu är dubbelsträngat, kan existera i cellen under ganska lång tid och återgå till kärnan för nästa replikationscykel. Om den nya viruspartikeln inte utsätts för ytterligare replikation, nukleokapsiden som bildas genom att passera genom cellmembranet, täckt superkapsidom, knopp från cellen, och det är omedelbart stoppas kort förlängning av "plus" -kedjan DNA. Därför varierar längden på denna tråd. I en typisk akut form av hepatit B-serologiska markörer följande sekventiellt visas i blodet: HBsAg, HBeAg och antikroppar (IgM, IgG): anti-HBcAg. Anti-HBeAg och anti-HBsAg.

Sammansättningen av hepatit B-virus har onkogenen, men fann att, tränger in i cellulära kromosomen (i sina olika sektioner) kan det virala DNA induceras i dem olika genetiska justering - deletion, translokation, amplifiering, vilket kan orsaka utvecklingen av levercancer - en av de allvarligaste konsekvenserna av viral hepatit B.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8],

Resistens av hepatit B-viruset

Hepatit B-viruset är mycket resistent. Vid rumstemperatur förblir det livskraftigt i 3 månader, i fruset tillstånd - i flera år. Viruset är fullständigt inaktiveras genom autoklavering (120 ° C) vid återflöde i 30 min, med torr värme vid en temperatur av 180 "C under 60 min, vid 60 ° C -. För 10 timmar resistenta i surt medium, men förstörs i en alkalisk. Virus dödas genom behandling H202, kloramin, formalin, fenol och UV-strålning.

Patogenes och symtom på hepatit B

Viruset injiceras hematogent direkt i levern. I patogenesen av hepatit spelar autoimmuna humorala och cellulära reaktioner en viktig roll. Det antas att den hepatocyt förlust beroende inte så mycket att den direkta verkan av själva viruset, men med värdimmunologiska reaktioner som sker i samband med modifiering av cellmembranet av virala proteiner som inducerar uppkomsten av autoantikroppar mot leverceller. Därför kan utveckling av kronisk hepatit och levercirros anses vara en autoimmun sjukdom.

Celluella autoimmuna reaktioner mot virusproteiner som finns i hepatocytmembranet medieras av T-cytotoxiska lymfocyter och andra leverdödande celler. Därför kan akut dystrofi betraktas som en reaktion av avstötning av en särskild heterograft.

Inkubationsperioden varar från 45 till 180 dagar, i genomsnitt 60 till 90 dagar. Den kliniska kursen av hepatit B karakteriseras av stor mångfald; sjukdomen kan uppstå: i latent form detekteras endast genom laboratoriemetoder, i en typisk isterisk form och i en malign form som slutar dödlig. Varaktigheten av det pre-jaundiced steget varierar från en dag till flera veckor. Den iktiska perioden är som regel lång och kännetecknas av väl märkta symtom (gulsot, hyperbilirubinemi, urinblodning, urinvärksklera). Utdragen form observerats hos 15-20% av patienterna och 90% av dem utvecklar kronisk hepatit B. Patienter med kronisk bildar oftast observerade autoimmuna processer åtföljs av en hög halt av protivopechenochnyh antikroppar som detekteras genom enzymkopplad immunsorbentanalys (IPM). Hos barn är hepatit B mild och ofta utan gulsot hos unga barn - mestadels asymptomatisk.

Postinfektiös immunitet (humoral och cellulär) är lång livslång på grund av virusneutraliserande antikroppar (anti-HBsAg) i frånvaro av ytantigen i blodet. Ofta observerad latent immunisering på grund av upprepad kontakt med HBV, vilket är orsaken till omfattande immunitet mot viruset bland befolkningen. Vanligtvis återhämtar patienter med akut form av hepatit B fullständigt när antikropparna ackumuleras till det. I vissa fall produceras emellertid inte antikroppar mot det trots de höga nivåerna av virusantigen i blodet (en omständighet som förklarar varför parenteral infektion förekommer oftast). Viruset kvarstår i levern, och en person under lång tid, ibland för livet, blir en kronisk bärare. Denna omständighet är uppenbarligen kopplad till ett svagt immunsvar. Ett av de vanligaste resultaten av kronisk hepatit B är cirros och levercancer, som utvecklas efter en latent period på upp till 30-50 år.

Epidemiologi av hepatit B

Källan för infektion med hepatit B-viruset är bara en person. Motsats till tidigare representationer att infektion med hepatit B-virus sker uteslutande genom den parenterala vägen, är nu bevisat att det finns i olika sekret och utsöndringar :. Saliv, nasofaryngeala sekret, avföring, tårvätska, sädesvätska, menstruationsblod, etc. Således, infektion inträffar inte bara genom den parenterala vägen, utan även sexuell och vertikala (från moder till foster), t. E. Praktiskt taget infektion med hepatit B-virus kan på många sätt.

Hepatit B i världen dödade så många människor som under alla år av andra världskriget. Antalet bärare av HBV, enligt WHO, är från 0,1 till 20% av befolkningen i olika länder eller regioner.

[9], [10], [11], [12], [13], [14], [15], [16],

Diagnos av hepatit B

För närvarande är den huvudsakliga metoden för att diagnostisera hepatit B användningen av en omvänd passiv hemagglutinationsreaktion (ROSGA) för att detektera ett virus eller dess ytantigen, HBsAg. Som redan noterat innehåller blodet av ytantigenet många gånger mer än själva viruset (100-1000 gånger). För reaktionen av ROPGA är erytrocyter sensibiliserade med antikroppar mot hepatit B-viruset. Om det finns ett antigen i blodet uppträder en hemagglutineringsreaktion. ROPGA är enkelt, bekvämt, mycket specifikt. För att detektera antikroppar mot HBsAg-virusantigenet används olika immunologiska metoder (DSC, RPGA, IFM, RIM, etc.). Dessutom används PCR-varianter för att detektera HBV och dess antigener.

Olika immunologiska metoder kan användas för att detektera antikroppar i serum hos patienten till en viral antigen (HBsAg) (RSK, TPHA, utfällningsreaktion, IPM etc. HLR.).

[17], [18], [19], [20], [21], [22],

Särskilt förebyggande av hepatit B

Med tanke på den höga incidensen av hepatit B och också att det finns många HBV-bärare i världen är WHO-vaccinationer mot hepatit B obligatoriska och måste utföras under det första året av livet. Två typer av vacciner föreslås för vaccination. För att förbereda en av dem används plasma av virusbärare som råmaterial, eftersom virusantigenet i det finns i tillräckliga mängder för att bereda vaccinet. Huvudvillkoren för framställning av denna typ av vaccin är deras fullständiga säkerhet, dvs fullständig inaktivering av viruset, vilket tillhandahålls genom vaccinberedningsteknik. För att tillverka ett vaccin av en annan typ används genetiska metoder, i synnerhet används en rekombinant klon av jäst som producerar ytantigenet av hepatit B-viruset för att framställa det antigena materialet.

Båda vaccinerna är mycket effektiva (skydda 95% av vaccinerade). Varaktigheten av postvaccinal immunitet är inte mindre än 5-6 år. Vacciner har skapats för både vuxna och spädbarn och småbarn - den viktigaste komponenten i den globala kampen mot hepatit B. Hela vaccinationen består av tre injektioner:

Jag dos - omedelbart efter födseln II dos - efter 1-2 månader III dos - till slutet av det första levnadsåret.

Dessa vacciner som ingår i det utvidgade program för immunisering, WHO och i linje med tidsplanen för dess genomförande (enligt WHO: s rekommendationer på 1: a levnadsåret genomförs vaccination mot tuberkulos, polio, hepatit B, mässling, stelkramp, difteri, kikhosta).

Gammaglobulin, innehållande antikroppar mot HBV, används för akut passiv immunoprofylakse mot personer som har haft kontakt med en hepatit B-patient.

För att behandla hepatit B (akuta och kroniska former) använd interferon och amixin (för induktion av dess endogena syntes). Vid behandling av kronisk hepatit B är ett nytt läkemedel lamivudin (syntetisk nukleosid) effektiv.