Infektiös mononukleos: antikroppar mot Epstein-Barr-viruset i blodet

Infektiös mononukleos är en vanlig systemisk lymfoproliferativ sjukdom, som oftast orsakas av Epstein-Barr-viruset. Toxoplasma gondii och andra virus (CMV, humant immunbristvirus och humant herpesvirus typ 6, erkänt som orsak till plötsligt exantem) kan orsaka kliniskt liknande sjukdomar. Dessa samma etiologiska medel är förmodligen kapabla att orsaka utvecklingen av kronisk trötthetssyndrom.

Epstein-Barr-viruset är ett virus från herpesgruppen, som har en tropism för B-lymfocyter, kvarstår länge i värdcellerna som en latent infektion. Det är utbrett i hela världen. Genom struktur och storlek är Epstein-Barr-viruset oskiljbart från andra herpesvirusar, men skiljer sig avsevärt från dem i antigena egenskaper. Viruset har ett membran antigen (MA-membran antigen), ett kärnantigen (EBNA-Epstein-Barris nukleärt antigen) och ett viralt kapsidantigen (VCA).

Infektion uppstår när viruset överförs med saliv. Epstein-Barr-virus vid förtäring infekterar svalgepitel, orsakar inflammation och feber - de typiska kliniska tecken började infektiös mononukleos. Strikt lymfotropt virus, sammanfogning S3α receptorcellmembranet av B-lymfocyter inducerar proliferation av polyklonala B-lymfocyter med en motsvarande ökning i tonsillerna, systemisk lymfadenopati och splenomegali. B-lymfocyter transformeras (förvärva förmågan att oändlig division), och i avsaknad av en adekvat cellulärt immunsvar, kan denna process utvecklas uppenbarligen malign (t.ex. X-kopplad lymfoproliferativ syndrom). Om de cellulära immunitetsfaktorerna kontrollerar replikationen av Epstein-Barr-viruset i kroppen, försvinna de kliniska symptomen av infektiös mononukleos gradvis.

Liksom andra herpesvirus kan Epstein-Barr-virus kvar i en latent infektion (dess DNA som finns i kärnan av en liten mängd av B-lymfocyter). Episodisk asymtomatisk reaktivering av infektion - ett vanligt fenomen, ca 20% av friska unga människor utsöndrar viruset Epstein-Barr-virus med saliv. I individer med en skadad cellulär immunitet (t.ex. AIDS, ataxi-telangiektasi, i transplantatmottagare) kan utveckla en tydlig reaktiv infektion med hårig leukoplaki, interstitiell pneumonit, eller i form av en monoklonal B-cell-lymfom. Med Epstein-Barr-virus är associerat etiologi nasofarynxcancer och Burkitts lymfom.

En av manifestationerna av infektiös mononukleos är utseendet i perifert blod av atypiska lymfocyter (upp till 10% av det totala antalet lymfocyter). Atypiska lymfocyter finns i blodet från början av perioden av kliniska manifestationer av infektion. Deras innehåll i blodet når en topp i slutet av 2: a eller början av 3: e veckan och kan hålla sig på denna nivå upp till 1,5-2 månader. Fullständigt försvinnande uppträder vanligtvis vid början av den 4: e månaden från sjukdomsuppkomsten. Närvaron av atypiska lymfocyter är ett relativt okänsligt tecken på infektion orsakad av Epstein-Barr-viruset, men har en total specificitet på omkring 95%.

Proliferation av polyklonala B-lymfocyter i infektion som orsakas av Epstein-Barr-virus, genererar en stor variation av autoantikroppar hos patienten, såsom IgM-anti-i (kall agglutinin), reumatoid faktor, antinukleära antikroppar. De flesta av de ovanliga Ig som förekommer i infektiös mononukleos kallas Paul-Bunnel heterophile antikroppar. Dessa antikroppar tillhör klassen IgM, de har en affinitet för lamm och häst röda blodkroppar, inte är riktade mot någon antigen Epstein-Barr-virus. Heterofila antikroppar - Slumpmässiga produkter B-lymfoid proliferations (orsakas av Epstein-Barr-virus), visas de i den första veckan av infektiös mononukleos och gradvis försvinner under konvalescens, de är oftast inte påvisas i 3-6 månader.

Eftersom det initiala akuta infektionsstadiet blir latent, framträder genomerna av Epstein-Barr-viruset (unika antigener) i stort antal i alla celler och kärnantigenet släpps ut i miljön. Som svar på antigenet syntetiseras specifika antikroppar - värdefulla markörer av sjukdomsstadiet. Kort efter infektion av B-lymfocyter detekteras ett tidigt antigen (EA), ett protein som krävs för replikation av Epstein-Barr-viruset (och inte en strukturell viral komponent). Till det tidiga antigenet i patientens kropp syntetiseras antikroppar av klasserna IgM och IgG. Tillsammans med Epstein-Barr-virusets fulla virus uppträder antigener av viruskapsiden (VCA) och membrantigenet (MA). När den infektiösa processen sjunker, undviker en liten procentandel av B-lymfocyter infekterade med Epstein-Barr-viruset immunförstöring och bibehåller virusgenomet i latent form. Det nukleära antigenet (EBNA) av Epstein-Barr-viruset är ansvarigt för dess dubbelarbete och överlevnad.

Laboratorietester kan detektera antikroppar mot olika antigener.

Från de serologiska metoderna för att diagnostisera infektiös mononukleos är Paul-Bunnel-reaktionen (agglutination) vanligast för att detektera heterofila antikroppar i serum. Titern hos heterofila antikroppar 1: 224 och högre i patientens serum är känd som diagnostiskt signifikant, vilket bekräftar diagnosen infektiös mononukleos. Heterofil agglutination är positiv hos 60% ungdomar efter 2 veckor och 90% efter 4 veckor från början av kliniska manifestationer av sjukdomen. Därför behövs flera studier för att diagnostisera infektiös mononukleos: under den första veckan av sjukdomen (reaktionen kan vara negativ) och 1-2 veckor senare (reaktionen kan bli positiv). Innehållet av heterofila antikroppar minskar efter slutet av den akuta perioden av den infektiösa processen, men deras titer kan bestämmas inom 9 månader efter det att kliniska symptom har påbörjats. Paul-Bunnel-reaktionen kan vända sig från positiv till negativ, till och med mot bakgrund av återstående hematologiska och kliniska symptom hos patienten. Känsligheten hos metoden hos vuxna är 98%, specificiteten är 99%. Hos barn med infektiös mononukleos före 2 års ålder kan heterofila antikroppar endast detekteras hos 30% av patienterna, i åldern 2-4 år - i 75%, över 4 år - i mer än 90%. Metodens känslighet hos barn är mindre än 70%, specificiteten är 20%. Reduktion och återökning av titern hos heterofila antikroppar kan uppstå som svar på en annan infektion (oftast i virusinfektioner i övre luftvägarna). Paul-Bunnel-svaret är inte specifikt för Epstein-Barr-viruset. Titern hos heterofila antikroppar ger inte en korsreaktion och korrelerar inte med specifika antikroppar mot Epstein-Barr-viruset, det korrelerar inte heller med svårighetsgraden av sjukdomsförloppet. Testet är värdelöst för att diagnostisera kronisk form av infektiös mononukleos (positivt i genomsnitt endast hos 10% av patienterna).

Titers 1:56 eller mindre kan hittas hos friska människor och hos patienter med andra sjukdomar (reumatoid artrit, rubella). Falska positiva testresultat möts mycket sällan.

Närvarande, för detektion av antikroppar mot fårerytrocyter under användning av en metod för "enda fläck" (en glid agglutination), används det initialt som ett screeningtest. Genom känslighet är det jämförbart med Paul-Bunnel-reaktionen. Glid falska positiva test kan vara ca 2% av studierna (leukemi, malignt lymfom, malaria, röda hund, viral hepatit, karcinom i bukspottkörteln) och falsk-negativa vuxna - 5-7% av fallen.

Det bör noteras att spektret för diagnostiska testsystem producerade av företag baserat på bestämning av antikroppstiter är mycket bred, så det är nödvändigt att fokusera på den diagnostiska titer av antikroppar som anges i instruktionerna för testsystem.

Om hetero antikroppar inte är identifierade och kliniska bilden motsvarar infektiös mononukleos, är det nödvändigt att undersöka serum för specifika antikroppar av IgM och IgG. För detektion av specifika antikroppar mot Epstein-Barr-virus med användning av indirekt immunofluorescens metoder (tillåter att detektera antikroppar mot VCA och EA-antigener) antialexin-immunofluorescens (påvisa antikroppar till EA, VCA och EBNA-antigen) och IFA.

Antikroppar mot EA-antigen D-komponenten (anti-EA-D) uppträder även under den primära infektionens latenta period och försvinna snabbt med återhämtning.

Antikroppar mot EA-antigenen R-komponenten (anti-EA-R) kan detekteras 3-4 veckor efter sjukdomens kliniska manifestationer. De kvarstår i blodserumet i ungefär ett år, ofta detekterade med atypiska eller långvariga strömmar av infektiös mononukleos. Vanligtvis finns dessa antikroppar med Burkitt lymfom.

Antikroppar mot VCA-klass IgM (anti-VCA IgM) förekommer mycket tidigt, vanligtvis till kliniska symptom, de upptäcks vid sjukdomsuppkomsten i 100% av fallen. Höga titrar uppträder under 1-6 veckan från infektionsstart, de börjar minska från 3: e veckan och försvinner vanligtvis efter 1-6 månader. Anti-VCA IgM är nästan alltid närvarande i serumet med aktiv infektion, så metoden för deras detektion är mycket känslig och specifik för ett akut episode av infektiös mononukleos.

Antikroppar mot VCA-klass IgG (anti-VCA IgG) kan uppträda tidigt (i 1-4: e veckan), deras mängd når en topp vid den 2: a månaden av sjukdomen. I början av sjukdomen finns de i 100% av fallen. Endast 20% av patienterna visade en 4-faldig ökning i titern i studien av parasera. Titern minskar på återhämtningen, men finns inom flera år efter den överförda infektionen, därför är den användbar för diagnosen infektiös mononukleos. Förekomsten av anti-VCA-IgG indikerar ett tillstånd efter infektion och immunitet.

Antikroppar mot EBNA (anti-EBNA) framträder senare än alla, är sällan närvarande i sjukdoms akuta fas. Deras innehåll ökar under återhämtningsperioden (inom 3-12 månader), de kan kvarstå i blodet i många år efter sjukdomen. Bristen på anti-EBNA i närvaro av anti-VCA IgM och anti-EA IgM indikerar en ströminfektion. Detekteringen av anti-EBNA efter en tidigare negativ reaktion indikerar en befintlig infektion. Vid användning av ELISA-metoden är det möjligt att samtidigt detektera närvaron av anti-EBNA-klasser av IgM och IgG. Om mängden anti-EBNA IgM är större än anti-EBNA IgG, bör en akut infektion övervägas, med det omvända förhållandet som det föregående.

Till förmån för en akut primär infektion indikerar ett eller flera av följande symtom närvaron av:

• anti-VCA IgG (upptäckt tidigt och senare sänks innehållet);
• Högtiter (mer än 1: 320) eller 4-faldig ökning i titern av anti-VCA IgG under sjukdomsförloppet;
• en övergående ökning i titern av anti-EA-D (1:10 eller mer);
• tidigt anti-VCA-IgG utan anti-EBNA, och senare - framväxten av anti-EBNA.

Akut eller primär infektion som orsakas av Epstein-Barr-virus, uteslutas om titrar av anti-VCA-IgG och anti-EBNA i serum inte förändras under studien tiden (i den akuta fasen och återvinning).

Den konstanta närvaron av tidigt antigen och anti-VCA IgG i höga titrar indikerar en kronisk fas av infektion.

Detektion av antikroppar mot Epstein-Barr-viruset används för att diagnostisera infektiös mononukleos och kroniska infektioner orsakade av Epstein-Barr-viruset.

Antikroppar mot Epstein-Barr-virus kan påvisas i följande sjukdomar: sekundär immunbrist, inklusive HIV-infektion, nasofaryngealt karcinom, Burkitts lymfom, CMV-infektion, syfilis, borrelia, brucellos och andra.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]