Medicinsk expert av artikeln
Nya publikationer
Sauzern-blotting
Senast recenserade: 23.04.2024
Allt iLive-innehåll är mediekontrollerat eller faktiskt kontrollerat för att säkerställa så mycket faktuell noggrannhet som möjligt.
Vi har strikta sourcing riktlinjer och endast länk till välrenommerade media webbplatser, akademiska forskningsinstitut och, när det är möjligt, medicinsk peer granskad studier. Observera att siffrorna inom parentes ([1], [2] etc.) är klickbara länkar till dessa studier.
Om du anser att något av vårt innehåll är felaktigt, omodernt eller på annat sätt tveksamt, välj det och tryck på Ctrl + Enter.
Southern blotting (utvecklad av E. Southern och R. Davies 1975) är den huvudsakliga metoden genom vilken gener av en viss sjukdom identifieras. För detta extraheras och bearbetas DNA från patientens celler med en av restriktionsendonukleaser (eller flera). De resulterande fragmenten utsätts för elektrofores, vilket gör det möjligt för dem att dimensioneras i storlek (mindre fragment rör sig snabbare genom porerna av gelén). Sedan överförs fragmenten (återtryckta) till ett nitrocellulosafilter, på vilket den radioaktivt märkta proben är skiktad. Sonden binder endast till den komplementära sekvensen. Därefter bestäms med hjälp av metoden för autoradiografi positionen av det önskade fragmentet av genomiskt DNA på elektroforegrammet.
Hybridisering med de märkta DNA-sond RNA- eller DNA-beredningar, droppa tillfogas den fasta matrisen utan föregående restriktion och elektrofores kallas Dot och slits hybridisering beroende på konfigurationen av DNA-fläckar på filtret (runda eller långsträckta, respektive).
[