Medicinsk expert av artikeln
Nya publikationer
Southern blotting
Senast recenserade: 05.07.2025
Allt iLive-innehåll är mediekontrollerat eller faktiskt kontrollerat för att säkerställa så mycket faktuell noggrannhet som möjligt.
Vi har strikta sourcing riktlinjer och endast länk till välrenommerade media webbplatser, akademiska forskningsinstitut och, när det är möjligt, medicinsk peer granskad studier. Observera att siffrorna inom parentes ([1], [2] etc.) är klickbara länkar till dessa studier.
Om du anser att något av vårt innehåll är felaktigt, omodernt eller på annat sätt tveksamt, välj det och tryck på Ctrl + Enter.
Southern blotting (utvecklad av E. Southern och R. Davis år 1975) är den huvudsakliga metoden som för närvarande används för att identifiera gener för en specifik sjukdom. För att göra detta extraheras DNA från patientens celler och behandlas med en eller flera restriktionsendonukleaser. De resulterande fragmenten utsätts för elektrofores, vilket gör att de kan separeras efter storlek (mindre fragment rör sig snabbare genom gelens porer). Fragmenten överförs (återtrycks) sedan till ett nitrocellulosafilter, på vilket en radioaktivt märkt prob läggs. Proben binder endast till den komplementära sekvensen. Sedan bestäms positionen för det önskade fragmentet av genomiskt DNA på elektroferogrammet med hjälp av autoradiografi.
Hybridisering med en märkt DNA-sond av DNA- eller RNA-preparat applicerade droppvis på en fast matris utan preliminär restriktion och elektrofores kallas punkt- eller slitshybridisering, beroende på konfigurationen av DNA-fläcken på filtret (rund respektive avlång).
[