Hepatit C PCR

HCV förekommer normalt sett inte i materialet.

Till skillnad från serologiska metoder för att diagnostisera viral hepatit C, som detekterar antikroppar mot HCV, möjliggör PCR direkt detektion av HCV-RNA och kvantifiering av dess koncentration i testmaterialet. Testet har artspecificitet och hög känslighet: tio HCV-RNA-molekyler i testmaterialet räcker för att detektera det. Detektion av antikroppar mot HCV bekräftar endast att patienten är smittad, men tillåter inte att bedöma aktiviteten i den infektiösa processen (virusreplikation) och sjukdomens prognos. Dessutom detekteras antikroppar mot HCV både i blodet hos patienter med akut och kronisk hepatit, och hos de patienter som var sjuka och tillfrisknade, och ofta uppträder antikroppar i blodet först några månader efter att den kliniska bilden av sjukdomen debuterat, vilket komplicerar diagnosen. Detektion av HCV i blodet med PCR är en mer informativ diagnostisk metod. Detektion av HCV-RNA i PCR indikerar viremi, möjliggör bedömning av virusets replikation i kroppen och fungerar som ett av kriterierna för effektiviteten av antiviral behandling. Detektion av HCV-RNA med PCR i tidiga stadier av virusinfektion i fullständig avsaknad av serologiska markörer kan fungera som det tidigaste beviset på infektion. Isolerad detektion av HCV-RNA i fullständig avsaknad av andra serologiska markörer kan dock inte helt utesluta ett falskt positivt PCR-resultat. I sådana fall är en omfattande bedömning av kliniska, biokemiska och morfologiska studier med upprepad bekräftelse av infektion med PCR nödvändig.

Användningen av PCR-metoden hos patienter med kronisk viral hepatit C är av stor betydelse, eftersom de flesta av dem saknar en korrelation mellan förekomsten av virusreplikation och aktiviteten hos leverenzymer. I sådana fall tillåter endast PCR oss att bedöma förekomsten av virusreplikation, särskilt om det slutliga resultatet uttrycks kvantitativt. I de flesta fall av sjukdomen sker försvinnandet av HCV-RNA från blodserumet senare än normaliseringen av leverenzymer, så deras normalisering kan inte tjäna som grund för att avbryta antiviral behandling.

Det är praktiskt viktigt att undersöka inte bara blodserum, utan även lymfocyter och hepatobiopsiprover med PCR-metoden för att detektera HCV-RNA. Virus kan detekteras 2-3 gånger oftare i levervävnad än i blodserum. Vid utvärdering av resultaten av ett blodserumtest för HCV-RNA bör man komma ihåg att viremi kan vara fluktuerande till sin natur (liksom förändringar i enzymaktivitet). Därför kan ett negativt resultat erhållas efter positiva PCR-testresultat och vice versa. I sådana fall är det bättre att undersöka hepatobiopsiprover för att undanröja eventuella tvivel som uppstår.

Detektion av HCV-RNA i material med hjälp av PCR används för följande ändamål:

• lösning av tvivelaktiga serologiska testresultat;
• differentiering av viral hepatit C från andra former av hepatit;
• identifiering av sjukdomens akuta stadium i jämförelse med tidigare infektion eller kontakt; bestämning av infektionsstadiet hos nyfödda från HCV-seropositiva mödrar;
• övervakning av effektiviteten av antiviral behandling.

Patienter med misstänkt viral hepatit C:

• givare;
• personer med riskfaktorer;
• individer med förhöjd ALAT-aktivitet;
• patienter med akut hepatit

Alla ovan nämnda egenskaper vid utvärdering av resultat och metoder för diagnos av HCV med PCR gäller även för andra infektioner.

PCR-metoden möjliggör inte bara detektion av HCV-RNA i det studerade materialet, utan även fastställande av dess genotyp. Bestämning av virusgenotypen är av stor betydelse för urvalet av patienter med kronisk viral hepatit C för behandling med interferon alfa och ribavirin. Laboratorieindikationer för behandling av kronisk viral hepatit C med interferon alfa är följande:

• ökad transaminasaktivitet;
• närvaro av HCV-RNA i blodet;
• HCV-genotyp 1;
• hög viremi i blodet (mer än 8×105 ^kopior /ml).

För närvarande är det möjligt att kvantitativt bestämma HCV RNA-innehållet i blodserum med hjälp av PCR-metoden, vilket är av stor betydelse för övervakning av interferon alfa-behandling. Vireminivån bedöms enligt följande: vid HCV RNA-innehåll från 10² ^till 10³ ^kopior /ml - svag; från 10³ ^till 10³ ^kopior /ml - genomsnittlig, över ^10³ kopior/ml - hög. Med effektiv behandling minskar vireminivån.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]