Antibiotikaresistens hos mikroorganismer: metoder för bestämning

Antibiotika - En av de största resultaten av medicinsk vetenskap, som årligen sparar liv för tiotals och hundratusentals människor. Men som visdom säger, har en gammal kvinna också en utvisning. Vad tidigare dödade patogena mikroorganismer fungerar idag inte som det brukade. Så vad är orsaken: blev antimikrobiella sämre eller på grund av antibiotikaresistens?

Bestämning av antibiotikaresistens

Antimikrobiella medel (APM), som kallas antibiotika, skapades ursprungligen för att bekämpa bakteriell infektion. Och på grund av det faktum att olika sjukdomar kan orsaka att inte en men flera sorter av bakterier grupperade tillsammans, genomfördes ursprungligen läkemedelsutveckling mot en viss grupp smittämnen.

Men bakterier, även om de enklaste, men aktivt utvecklande organismerna, förvärvar så småningom fler och fler nya egenskaper. Instinktet för självbehållande och förmågan att anpassa sig till olika livsvillkor gör patogena mikroorganismer starkare. Som svar på hotet mot livet, börjar de utveckla sig själva förmågan att motstå det, vilket framhäver en hemlighet som försvagar eller helt neutraliserar effekten av den aktiva substansen i antimikrobiella ämnen.

Det visar sig att en gång effektiv antibiotika helt enkelt slutar att uppfylla sin funktion. I det här fallet talar de om utvecklingen av antibiotikaresistens mot läkemedlet. Och poängen här är inte alls effektiviteten av AMPs aktiva substans, utan i mekanismerna för förbättring av patogena mikroorganismer, genom vilka bakterier inte blir känsliga för antibiotika avsedda att bekämpa dem.

Så antibiotikaresistens är inget annat än en minskning av bakteriens mottaglighet för antimikrobiella läkemedel som skapades för att förstöra dem. Det är av den anledningen att behandling, verkar vara korrekt vald preparat ger inte de förväntade resultaten.

[1], [2], [3], [4], [5], [6],

Problemet med antibiotikaresistens

Bristen på antibiotikabehandling i samband med antibiotikaresistens leder till att sjukdomen fortsätter att utvecklas och blir en tyngre form, vars behandling blir ännu svårare. Särskilt farliga är fall där en bakteriell infektion påverkar vitala organ: hjärtat, lungorna, hjärnan, njurarna, etc., för i detta fall är fördröjningen i död liknande.

Den andra faran är att vissa sjukdomar med kronisk antibiotikabehandling kan bli kroniska. En person blir bärare av förbättrade mikroorganismer som är resistenta mot antibiotika hos en viss grupp. Han är nu källa till infektion, för att bekämpa vilka gamla metoder blir meningslösa.

Allt detta driver läkemedelsvetenskapen till uppfinningen av nya, effektivare medel med andra aktiva substanser. Men processen går igen med utvecklingen av antibiotikaresistens mot nya läkemedel från kategorin antimikrobiella medel.

Om någon verkar tro att problemet med antibiotikaresistens har uppstått ganska nyligen, är han mycket misstag. Detta problem är gammalt som världen. Jo kanske inte så mycket, och ändå är hon redan 70-75 år gammal. Enligt den allmänt accepterade teorin framträdde den tillsammans med introduktionen av den första antibiotiken i medicinsk praktik någonstans under 40-talet av 20-talet.

Även om det finns ett begrepp om ett tidigare utseende av problemet med resistens hos mikroorganismer. Före tillkomsten av antibiotika var detta problem inte specifikt behandlat. Det är så naturligt att bakterier, som andra levande saker, försökte anpassa sig till ogynnsamma miljöförhållanden, gjorde det på egen väg.

Problemet med resistens hos patogena bakterier återkallade sig när de första antibiotika uppträdde. Men då var frågan inte så viktig. Vid den tiden aktivt genomfört utvecklingen av olika grupper av antibiotika, som på vissa sätt berodde på ogynnsamma politiska situationen i världen, krig, när soldater dog av sår och sepsis bara för att de inte kunde ge effektivt stöd på grund av brist på läkemedel. Bara dessa droger existerade inte än.

Det största antalet utvecklingar genomfördes under 50-60 år av det tjugonde århundradet, och under de närmaste 2 årtiondena genomfördes deras förbättring. Framsteg på detta har inte upphört, men sedan 80-talet har utvecklingen med avseende på antibakteriella medel blivit märkbart mindre. Skylla om stora kostnader för företaget (utveckling och produktion av en ny produkt i vår tid kommer redan till gränsen i US $ 800 miljoner), eller helt enkelt brist på nya idéer för "militanta" aktiva substanser för innovativa läkemedel, men i samband med problemet med antibiotikaresistens bortom till en ny skrämmande nivå.

Samtidigt som man utvecklade lovande AMP och skapade nya grupper av sådana droger hoppades forskare att besegra flera typer av bakterieinfektion. Men allt visade sig vara så enkelt "tack" mot antibiotikaresistens, vilket utvecklas ganska snabbt i enskilda bakterier. Entusiasmen torkar gradvis upp, men problemet kvarstår oupplöst under lång tid.

Det är fortfarande oklart hur mikroorganismer kan utveckla resistens mot droger, vilka teoretiskt skulle döda dem? Här är det nödvändigt att förstå att "dödandet" av bakterier endast inträffar när läkemedlet används för sitt avsedda syfte. Och vad har vi egentligen?

Orsaker till antibiotikaresistens

Här kommer vi till den viktigaste frågan om vem som bär skulden, att bakterierna när de utsätts för antibakteriella medel inte dö, och rent av degenererade genom att förvärva nya egenskaper, som inte är i händerna på mänskligheten? Vad provocerar sådana förändringar som uppstår med mikroorganismer som orsakar många sjukdomar som mänskligheten har kämpat för i mer än ett decennium?

Det är uppenbart att den verkliga orsaken till utveckling av antibiotikaresistens är att levande organismer kan överleva under olika förhållanden och anpassar sig till dem på olika sätt. Men förmågan att undvika en dödlig projektil i ansiktet av ett antibiotikum, som i teorin borde bära döden till dem, gör bakterierna inte. Så hur visar det sig att de inte bara överlever, utan också förbättras tillsammans med förbättringen av läkemedelstekniken?

Det bör förstås att om det finns ett problem (i vårt fall utvecklingen av antibiotikaresistens i patogena mikroorganismer), så finns det provocerande faktorer som skapar förutsättningar för det. Bara i denna fråga försöker vi nu förstå.

[7], [8], [9], [10], [11],

Faktorer för utveckling av antibiotikaresistens

När en person kommer till en läkare med klagomål om sin hälsa, förväntar han sig kvalificerad hjälp från en specialist. Om det kommer till en infektion i luftvägarna eller andra bakteriella infektioner är läkarens uppgift att förskriva ett effektivt antibiotikum som inte kommer att låta sjukdomen utvecklas och bestämma den dos som är nödvändig för detta ändamål.

Valet av läkemedel hos läkaren är tillräckligt stort, men hur man bestämmer exakt det läkemedel som verkligen hjälper till att klara infektionen? Å ena sidan för att motivera utnämningen av ett antimikrobiellt läkemedel är det nödvändigt att först bestämma typen av patogen, enligt det etiotropa begreppet läkemedelsval, vilket anses vara det mest korrekta. Men å andra sidan kan det ta upp till 3 eller flera dagar, medan det viktigaste villkoret för framgångsrik botemedel anses vara aktuell behandling i de tidiga skeden av sjukdomen.

Läkaren har inget kvar att göra, efter att diagnosen gjordes, att slumpmässigt handla de första dagarna, för att på något sätt sakta ner sjukdomen och förhindra att den sprider sig till andra organ (ett empiriskt tillvägagångssätt). Vid utnämning av en poliklinisk behandling utgår utövaren från antagandet att vissa bakterier kan vara orsakssambandet till en viss sjukdom. Detta är anledningen till det första valet av läkemedlet. Syftet kan variera beroende på resultaten av analysen för patogenen.

Och det är bra om läkarens möte bekräftas av testresultaten. Annars kommer inte bara tiden att gå vilse. Saken är att för en lyckad behandling finns det ytterligare ett nödvändigt villkor - fullständig avaktivering (i medicinsk terminologi finns det ett begrepp "irradikation") av patogena mikroorganismer. Om detta inte händer, blir de överlevande mikroberna "sjuka", och de kommer att utveckla en slags immunitet mot den aktiva substansen i det antimikrobiella läkemedlet som orsakade deras "sjukdom". Detta är lika naturligt som produktionen av antikroppar i människokroppen.

Det visar sig att om antibiotikumet plockas upp felaktigt eller ineffektivt kommer doserings- och mottagningsregimen att visa sig att patogena mikroorganismer inte kan förfalla, men förändra eller förvärva tidigare okarakteristiska möjligheter. Uppfödning bildar sådana bakterier hela populationer av stammar resistenta mot antibiotika hos en viss grupp, d.v.s. Antibiotikaresistenta bakterier.

En annan faktor som negativt påverkar mottagligheten av patogena mikroorganismer mot antibakteriella läkemedel är användningen av AMP i djurhållning och veterinärmedicin. Användningen av antibiotika i dessa områden är inte alltid motiverad. Dessutom är definitionen av orsaksmedlet för sjukdomen i de flesta fall inte genomförd eller utförs med förseningar, eftersom antibiotika behandlas huvudsakligen djur som är i ett ganska allvarligt tillstånd, när allt bestäms av tiden och det är inte möjligt att vänta på resultaten av analysen. Och i byn har veterinären inte ens en sådan möjlighet, så han agerar "blint".

Men det vore ingenting, bara det finns ett annat stort problem - den mänskliga mentaliteten, när alla är en läkare för sig själv. Dessutom förvärrar utvecklingen av informationsteknik och möjligheten att köpa de flesta antibiotika utan läkare recept bara försvårar detta problem. Och om vi tar hänsyn till att vi har mer än okvalificerade självlärda läkare än de som strikt följer doktors föreskrifter och rekommendationer, får problemet en global dimension.

I vårt land förvärras situationen av det faktum att de flesta förblir ekonomiskt konkursa. De har inte möjlighet att köpa effektiva, men dyra droger av en ny generation. I det här fallet ersätter de utnämningen av en läkare med billigare gamla analoger eller droger, som den bästa vännen eller allveten vän rekommenderade.

"Det hjälpte mig och hjälper dig!" - Kan du argumentera med detta om orden låter från läppar till en granne som har behärskat den rika livserfarenheten, som passerade kriget? Och få människor tror att tack vare sådana välläsna och tillförlitliga patogena mikroorganismer har de länge anpassats för att överleva under verkan av läkemedel som rekommenderats tidigare. Och vad som hjälpt farfar 50 år sedan, kan vara ineffektivt i vår tid.

Och vad kan vi säga om reklam och oförklarliga önskemål hos vissa människor att försöka innovationer på sig själva, så snart den symptompassade sjukdomen visar sig. Och varför alla dessa läkare, om det finns så underbara droger som vi lär oss om från tidningar, TV-skärmar och internetsidor. Bara texten om självmedicinering har redan blivit så tråkig att få människor uppmärksammar det nu. Och mycket förgäves!

[12], [13], [14], [15], [16], [17], [18], [19], [20],

Mekanismer mot antibiotikaresistens

Nyligen har antibiotikaresistens blivit det första problemet i den farmakologiska industrin som utvecklar antimikrobiella medel. Saken är att den är inneboende i nästan alla kända bakterier, så antibiotikabehandling blir mindre effektiv. Sådana vanliga patogener som Staphylococci, Escherichia coli och Pseudomonas aeruginosa, proteinerna har resistenta stammar som är vanligare än deras förfäder utsatta för antibiotika.

Motstånd mot olika grupper av antibiotika, och även till enskilda droger, utvecklas på olika sätt. Bra gamla penicillin och tetracykliner, samt en ny utveckling i form av cefalosporiner och aminoglykosider kännetecknas av långsamma utvecklingen av antibiotikaresistens, parallellt med dessa minskar och deras terapeutiska effekt. Vad kan inte sägas om sådana droger, vars aktiva substans är streptomycin, erytromycin, rifampicin och lincomycin. Motståndet mot dessa läkemedel utvecklas i snabb takt, i samband med vilken utnämningen måste ändras även under behandlingens gång utan att vänta på uppsägningen. Detsamma gäller för beredningar av oleandomycin och fusidin.

Allt detta ger anledning att anta att mekanismerna för utveckling av antibiotikaresistens mot olika läkemedel är signifikant olika. Låt oss försöka förstå vilka egenskaper hos bakterier (naturliga eller förvärvade) inte tillåter antibiotika att producera deras bestrålning, vilket ursprungligen var tänkt.

Till att börja med bestämmer vi att bakteriens motstånd kan vara naturligt (skyddsfunktioner som ges till det) och förvärvades, vilket vi diskuterade ovan. Hittills har vi främst talar om den verkliga antibiotikaresistens, i samband med funktionerna i mikroorganismen, snarare än de felaktiga val eller utnämning av läkemedlet (i detta fall talar vi om falsk antibiotikaresistens).

Varje levande varelse, inklusive det enklaste, har sin egen unika struktur och vissa egenskaper som gör det möjligt att överleva. Allt detta läggs ner genetiskt och överförs från generation till generation. Den naturliga resistensen mot specifika aktiva substanser av antibiotika är också nedlagd genetiskt. Och i olika typer av bakterier riktas motstånd mot en viss typ av läkemedel, varför utvecklingen av olika grupper av antibiotika som påverkar en viss typ av bakterier är associerad.

Faktorer som orsakar naturligt motstånd kan vara olika. Exempelvis kan strukturen hos proteinmembranet hos en mikroorganism vara sådan att ett antibiotikum inte kan klara det. Men antibiotika kan bara påverkas av en proteinmolekyl, förstöra den och orsaka en mikroorganismers död. Utvecklingen av effektiva antibiotika innebär att man tar hänsyn till strukturen hos proteinerna från bakterier mot vilka läkemedlets verkan riktas.

Exempelvis beror antibiotikaresistensen hos stafylokocker mot aminoglykosider på det faktum att den senare inte kan penetrera det mikrobiella membranet.

Hela ytan på mikroben är täckt med receptorer, med vissa typer som är associerade med AMP. Ett litet antal lämpliga receptorer eller deras fullständiga frånvaro leder till det faktum att det inte finns någon bindning, och således är den antibakteriella effekten frånvarande.

Bland andra receptorer finns också de som för antibiotikan tjänar som ett slags stråle som signalerar platsen för bakterierna. Frånvaron av sådana receptorer tillåter mikroorganismen att gömma sig från fara i form av AMP, vilket är ett slags förklädnad.

Vissa mikroorganismer har en naturlig förmåga att aktivt dra AMP från cellen. Denna förmåga kallas effluksom och karakteriserar motståndet hos Pseudomonas aeruginosa mot karbapenem.

Biokemisk mekanism för antibiotikaresistens

Förutom de naturliga mekanismerna för utveckling av antibiotikaresistens som anges ovan finns det en enda som inte är relaterad till bakteriecellens struktur, utan med dess funktionella.

Det faktum att i kroppen av bakterier kan produceras enzymer som kan ha en negativ effekt på AMPs molekyler och minska dess effektivitet. Bakterier när de interagerar med ett sådant antibiotikum lider också, deras effekt är märkbart försvagad vilket medför utseende av härdning av infektion. Trots detta är patienten en bärare av bakteriell infektion i någon tid efter den så kallade "återhämtningen".

I det här fallet handlar det om en modifiering av antibiotikumet, vilket medför att det blir inaktivt med avseende på denna typ av bakterier. Enzymer som produceras av olika typer av bakterier kan skilja sig åt. Staphylococcus kännetecknas av syntesen av beta-laktamas, vilket provar brottet av laktemringen av antibiotika i penicillinserien. Utvecklingen av acetyltransferas kan förklara motståndet mot kloramfenikolgram-negativa bakterier etc.

[21], [22], [23]

Förvärvat antibiotikaresistens

Bakterier, som andra organismer, är inte främmande för evolutionen. Som svar på "militära" åtgärder mot dem kan mikroorganismer förändra sin struktur eller börja syntetisera så mycket av ett enzymämne som inte bara kan minska läkemedlets effektivitet utan även förstöra det fullständigt. Till exempel gör aktiv produktion av alanintransferas "Cycloserine" ineffektivt mot bakterier som producerar den i stora mängder.

Antibiotikaresistens kan också utvecklas på grund av en modifiering i cellstrukturen hos proteinet, vilket också är dess receptor, till vilket AMP bör binda. Dvs denna typ av protein kan vara frånvarande i bakteriekromosomen eller ändra dess egenskaper, vilket leder till att förbindelsen mellan bakterien och antibiotikum blir omöjlig. Till exempel orsakar förlusten eller modifieringen av ett penicillinbindande protein okänslighet mot penicilliner och cefalosporiner.

Som en följd av utvecklingen och aktiveringen av skyddande funktioner i bakterier som tidigare är mottagliga för den destruktiva effekten av en viss typ av antibiotika förändras cellmembranets permeabilitet. Detta kan göras genom att minska kanalerna genom vilka AMP: s aktiva substanser kan tränga in i cellen. Det är dessa egenskaper på grund av streptokocks okänslighet för beta-laktamantibiotika.

Antibiotika kan påverka bakteriens cellulära metabolism. Som svar fick vissa mikroorganismer att göra utan kemiska reaktioner, vilka påverkas av antibiotikumet, vilket också är en separat mekanism för utveckling av antibiotikaresistens, vilket kräver konstant övervakning.

Ibland går bakterier till ett visst knep. Genom att gå med i en tät substans förenas de i samhällen som heter biofilmer. Inom samhället är de mindre känsliga för antibiotika och kan säkert tolerera doser som dödar för en enda bakterie som lever utanför "kollektivet".

Ett annat alternativ är att kombinera mikroorganismer i grupper på ytan av ett halvflytande medium. Även efter celldelning kvarstår en del av den bakteriella "familjen" inom "grupperingen", som inte kan påverkas av antibiotika.

[24], [25], [26], [27], [28], [29], [30]

Gen mot antibiotikaresistens

Det finns begrepp om genetisk och icke-genetisk drogresistens. Med den senare behandlar vi när vi betraktar bakterier med inaktiv metabolism, inte benägna att multiplicera under normala förhållanden. Sådana bakterier kan utveckla antibiotikaresistens mot vissa typer av läkemedel, men denna förmåga överförs inte heller till deras avkomma, eftersom det inte är genetiskt införlivat.

Detta är karakteristiskt för patogena mikroorganismer som orsakar tuberkulos. En person kan bli smittad och inte misstänker sjukdomen i många år, tills hans immunitet av någon anledning inte kommer att misslyckas. Detta är utlösaren för multiplikation av mykobakterier och sjukdomsprogressionen. Men alla samma droger används för att behandla tuberkulos, det bakteriella avkomman är fortfarande känsligt för dem.

Detsamma är sant med förlusten av protein i mikroväggens cellvägg. Kom ihåg igen om bakterier som är känsliga för penicillin. Penicilliner hämmar syntesen av proteinet som tjänar till att bygga cellmembranet. Under påverkan av AMP penicillinserier kan mikroorganismer förlora cellväggen, vars byggmaterial är penicillinbindande protein. Sådana bakterier blir resistenta mot penicilliner och cephalosporiner, som nu inte har något att kommunicera med. Detta fenomen är tillfälligt, inte relaterat till mutationen av gener och överföringen av den muterade genen genom arv. Med cellväggens utseende, som är karakteristisk för tidigare populationer, försvinner antibiotikaresistensen i sådana bakterier.

Det genetiska antibiotikaresistensen sägs inträffa när förändringar i cellerna och ämnesomsättningen inom dem förekommer på gennivå. Mutationer av gener kan orsaka förändringar i cellmembranets struktur, provocera produktionen av enzymer som skyddar bakterier från antibiotika, och ändrar också antalet och egenskaperna hos bakteriecellens receptorer.

Det finns 2 sätt att utveckla händelser: kromosomala och extrakromosomala. Om en genmutation uppträder på den del av kromosomen som är ansvarig för antibiotikans känslighet, talar de om kromosomalt antibiotikaresistens. En sådan mutation är i sig extremt sällan, vanligtvis orsakar läkemedlets effekter, men igen, inte alltid. Det är mycket svårt att kontrollera denna process.

Kromosomala mutationer kan överföras från generation till generation, och bildar gradvis vissa stammar (sorter) av bakterier som är resistenta mot ett eller annat antibiotikum.

Upprullare av extrakromosomal resistens mot antibiotika är genetiska element som existerar utanför kromosomerna och kallas plasmider. Det är dessa element som innehåller generna som ansvarar för produktionen av enzymer och permeabiliteten hos bakterieväggen.

Antibiotikaresistens är oftast resultatet av horisontell genöverföring, när vissa bakterier överför vissa gener till andra som inte är deras ättlingar. Men ibland obundna punktmutationer kan observeras i patogenens genom (storlek 1 i 108 för en process för kopiering av DNA i modercellen, vilket observeras vid replikering av kromosomer).

Så hösten 2015 beskriver forskare från Kina genen MCR-1, som finns i griskött och svintarmen. En egenskap hos denna gen är möjligheten att överföra den till andra organismer. Efter ett tag hittades samma gen inte bara i Kina utan även i andra länder (USA, England, Malaysia, europeiska länder).

Antibiotikaresistensgenen kan stimulera produktionen av enzymer som inte tidigare framställts i bakteriekroppen. Till exempel hittades enzymet NDM-1 (metall-beta-laktamas 1) i bakterier Klebsiella pneumoniae 2008. Först fann den sig i bakterier från Indien. Men i efterföljande år upptäcktes ett enzym som gav antibiotikaresistens mot de flesta AMP i mikroorganismer i andra länder (Storbritannien, Pakistan, USA, Japan, Kanada).

Patogena mikroorganismer kan vara resistenta mot vissa läkemedel eller grupper av antibiotika, såväl som olika grupper av läkemedel. Det finns en sådan sak som antibiotikaresistens när mikroorganismer blir okänsliga för läkemedel med liknande kemisk struktur eller verkningsmekanism på bakterier.

Antibiotikaresistens hos stafylokocker

Staphylokockinfektion anses vara en av de vanligaste bland gemenskapsförvärvade infektioner. Men även i ett sjukhus på ytorna av olika föremål är det möjligt att upptäcka cirka 45 olika stammar av stafylokocker. Detta tyder på att kampen mot denna infektion är nästan hälsoarbetarnas första prioritet.

Svårigheten med denna uppgift är att de flesta stammar av de flesta patogena stafylokocker Staphylococcus epidermidis och Staphylococcus aureus är resistenta mot många typer av antibiotika. Och antalet sådana stammar växer varje år.

Staphylokockernas förmåga att multiplicera genetiska mutationer, beroende på livsmiljöförhållandena, gör dem praktiskt taget oskadliga. Mutationer överförs till efterkommande och på kort tid finns det hela generationer av smittämnen som är resistenta mot antimikrobiella preparat från släktet Staphylococci.

Det största problemet - det är meticillinresistenta stammar, som är resistenta inte bara att beta-laktamer (antibiotika β-laktam: vissa undergrupper av penicilliner, cefalosporiner, karbapenemer och monobaktamer), men också andra typer av ILA: tetracykliner, makrolider, linkosamider, aminoglykosider, fluorokinoloner, kloramfenikol.

Under lång tid kan smittan förstöras med hjälp av glykopeptider. För närvarande löses problemet med antibiotikaresistens hos sådana stammar av stafylokocker med hjälp av en ny typ av AMP-oxazolidinoner, vars ljusa representant är linezolid.

[31], [32], [33], [34], [35], [36], [37], [38]

Metoder för bestämning av antibiotikaresistens

När man skapar nya antibakteriella läkemedel är det mycket viktigt att tydligt definiera dess egenskaper: hur de fungerar och vilka bakterier som är effektiva. Detta kan endast bestämmas genom laboratorieforskning.

Analys för antibiotikaresistens kan utföras med olika metoder, varav de mest populära är:

• Skivmetod eller diffusion av AMP i agar enligt Kirby-Bayer
• Metod för serieutspädningar
• Genetisk identifiering av mutationer som orsakar läkemedelsresistens.

Den första metoden hittills anses vara den vanligaste på grund av att det är billigt och enkelt att genomföra. Metoden enheter är att som ett resultat av dedikerade forsknings stammar av bakterier placeras i ett näringsmedium av tillräcklig densitet och täckt med papper indränkt i en lösning av AMP-enheter. Koncentrationen av antibiotikumet på skivorna är annorlunda, så när läkemedlet diffunderar in i bakteriemediet kan en koncentrationsgradient observeras. Med storleken på zonen för icke-tillväxt av mikroorganismer kan man bedöma preparatets aktivitet och beräkna den effektiva doseringen.

En variant av skivmetoden är E-testet. I detta fall används istället för skivor polymera plattor, på vilka en viss koncentration av antibiotikum appliceras.

Nackdelarna med dessa metoder anses felaktiga beräkningar associerade med koncentrationsgradienten beroende av olika förhållanden (densiteten hos mediet, temperatur, pH, kalcium och magnesium etc.).

Metoden för serieutspädningar baseras på skapandet av flera varianter av ett flytande eller tätt medium innehållande olika koncentrationer av testpreparatet. Var och en av varianterna befolks med en viss mängd av det bakteriella materialet som studeras. Vid slutet av inkubationsperioden beräknas tillväxten av bakterier eller dess frånvaro. Med denna metod kan du bestämma den minsta effektiva dosen av läkemedlet.

Metoden kan förenklas genom att endast ta 2 media, vars koncentration kommer att ligga så nära som möjligt för att inaktivera bakterierna.

Serieutspädningsmetoden anses med rätta vara guldstandarden för bestämning av antibiotikaresistens. Men på grund av den höga kostnaden och arbetskraften, är den inte alltid tillämplig inom den inhemska farmakologin.

Förfaranden för identifiering av mutationer ger information om närvaron av en särskild stam av bakterier muterade gener som bidrar till utvecklingen av antibiotikaresistens till specifika läkemedel, och därför situationer uppstår systematisera baserat likhet fenotypiska manifestationer.

Denna metod utmärks av den höga kostnaden för testsystem för dess genomförande, men dess värde för att förutsäga genetiska mutationer i bakterier är obestridligt.

Oavsett hur effektiv de ovanstående metoderna för antibiotikaresistensprovning, kan de inte helt reflektera bilden som utvecklas i den levande kroppen. Och om vi tar hänsyn till den tid som kroppen av varje person är olika, det finns olika processer kan passera distribution och metabolism av läkemedel, är experimentell bilden mycket långt från verkligheten.

Sätt att övervinna antibiotikaresistens

Oavsett hur bra det här eller det här läkemedlet är, men med den inställning till behandling som vi har kan man inte utesluta det faktum att känsligheten hos patogena mikroorganismer kan förändras. Skapandet av nya droger med samma aktiva substanser löser inte heller problemet med antibiotikaresistens. Och för nya generationer av droger försämras mikroorganismernas känslighet med frekventa ojusterade eller felaktiga möten gradvis.

Ett genombrott i detta avseende betraktas som uppfinningen av kombinerade preparat, som kallas skyddade. Deras användning är motiverad för bakterier som producerar destruktiva enzymer för vanliga antibiotika. Skydda populära antibiotika framställda genom införandet av det nya läkemedlet av speciella organ (t ex enzymhämmare, farliga för en viss typ ILA) är beskurna produktion av dessa enzymer förhindrar bakterier och eliminering av läkemedlet från cellen via en membranpump.

Som inhibitorer av beta-laktamaser är det vanligt att använda klavulansyra eller sulbaktam. De tillsätts i beta-laktam antibiotika, vilket ökar effektiviteten hos den senare.

För närvarande utvecklingen av droger som kan påverka inte bara de enskilda bakterierna, utan även de som har gått samman i grupper. Kampen mot bakterier i biofilmen kan endast genomföras efter destruktion och utsläpp av organismer som tidigare kopplats samman med kemiska signaler. När det gäller möjligheten att förstöra biofilm, överväger forskare en sådan typ av droger som bakteriofager.

Kampen mot andra bakteriella "grupperingar" genomförs genom överföring till ett flytande medium, där mikroorganismer börjar existera, och nu kan de bekämpas med konventionella droger.

Faced med fenomenet motstånd i processen med läkemedelsbehandling löser läkare problemet med att förskriva olika läkemedel som är effektiva mot de isolerade bakterierna, men med olika mekanismer för verkan på den patogena mikrofloran. Till exempel använder du samtidigt läkemedel med baktericid och bakteriostatisk verkan eller ersätter ett läkemedel med en annan, från en annan grupp.

Förebyggande av antibiotikaresistens

Den huvudsakliga uppgiften att behandla antibiotika är den fullständiga förstöringen av populationen av patogena bakterier i kroppen. Denna uppgift kan lösas endast genom utnämning av effektiva antimikrobiella medel.

Effekt bestäms enligt dess aktivitetsspektrum (oavsett om de ingår i detta intervall identifieras patogen) förmåga att övervinna antibiotiska resistensmekanismer, optimalt vald dosregim i vilken det finns förstörelse av patogen mikroflora. Dessutom bör sannolikheten för att utveckla biverkningar och tillgängligheten av behandling för varje enskild patient beaktas vid förskrivning av läkemedel.

Med ett empiriskt tillvägagångssätt för terapi av bakterieinfektioner är det inte möjligt att ta hänsyn till alla dessa punkter. Det kräver en hög professionalism hos doktorn och kontinuerlig övervakning av information om infektioner och effektiva droger för att bekämpa dem, så att utnämningen inte var obefogad och inte ledde till utveckling av antibiotikaresistens.

Skapandet av högteknologiska medicinska centra gör att man kan öva etiotropisk behandling när patogenen detekteras först på kortare tid och sedan administreras ett effektivt läkemedel.

Förebyggande av antibiotikaresistens kan också betraktas som kontroll av förskrivning. Till exempel i ARVI är utnämningen av antibiotika inte berättigad, men den bidrar till utvecklingen av antibiotikaresistens hos mikroorganismer som för närvarande befinner sig i ett "sovande" tillstånd. Det faktum att antibiotika kan prova en försvagning av immunitet, vilket i sin tur kommer att orsaka reproduktion av en bakterieinfektion som begravdes inuti kroppen eller in i den från utsidan.

Det är mycket viktigt att de föreskrivna läkemedlen uppfyller målet att uppnås. Även ett läkemedel som föreskrivs för profylaktiska ändamål bör ha alla egenskaper som är nödvändiga för att förstöra den patogena mikrofloran. Valet av läkemedlet slumpmässigt kan inte bara ge den förväntade effekten utan förvärrar även situationen genom utveckling av resistens mot framställning av en viss typ av bakterier.

Särskild uppmärksamhet bör ägnas åt dosering. Små doser, ineffektiva för att bekämpa infektion, leder igen till bildandet av antibiotikaresistens i patogener. Men det finns inte heller något behov av att överdriva det, för antibiotikabehandling är sannolikheten för att utveckla toxiska effekter och anafylaktiska reaktioner som är farliga för patientens liv stor. Speciellt om behandlingen utförs på poliklinisk grund utan någon kontroll av medicinsk personal.

Genom media måste förmedla till människor hela risken för självmedicinering med antibiotika, liksom den ofärdiga behandling, när bakterierna inte dödas, men bara blivit mindre aktiva för att utveckla mekanismer för antibiotikaresistens. Samma effekt tillhandahålls också av billiga, olicensierade läkemedel som olagliga läkemedelsföretag ställer sig som budgetmodeller av redan befintliga droger.

Hög mått på förebyggande av antibiotikaresistens anses vara en konstant övervakning av befintliga smittämnen och utvecklingen av deras antibiotikaresistens inte bara i nivå med distrikt eller region, utan även på nationell nivå (och även runt om i världen). Tyvärr har det bara att drömma.

I Ukraina finns inte systemet för infektionskontroll som sådan. Endast vissa bestämmelser har antagits, varav en (fortfarande 2007!), Vad gäller obstetriska sjukhus, innefattar införandet av olika metoder för övervakning av nosokomiella infektioner. Men allting vilar igen på ekonomi, och på marken är sådana studier oftast inte genomförda, för att inte tala om läkare från andra grenar av medicin.

I den ryska federationen på problemet med antibiotikaresistens som behandlats med mer ansvar, och ett bevis på detta är projektet "Karta över antibiotikaresistens i Ryssland." Forskning inom detta område, insamling av information och dess systematisering för antibiotikakart innehåll som är inblandade så stora organisationer som Research Institute of Antimicrobial Chemotherapy, inter Association of mikrobiologi och Antimicrobial Chemotherapy, samt vetenskaplig och metodisk antibiotikaresistens larmcentral inrättats på initiativ av den federala byrån för Health Care och social utveckling.

Information som tillhandahålls inom ramen för projektet uppdateras ständigt och är tillgänglig för alla användare som behöver information om antibiotikaresistens och effektiv behandling av infektionssjukdomar.

Förstå hur relevant problemet med att minska känsligheten hos patogena mikroorganismer och hitta en lösning på detta problem idag kommer gradvis. Men detta är redan det första steget i vägen för en effektiv kamp mot ett problem som kallas antibiotikaresistens. Och detta steg är extremt viktigt.