Dermalekvivalent. Historien och resultaten av kliniska prövningar

I slutet av åttiotalet utvecklades en flytande form av bovinkollagen vid Stanford University, som vid kroppstemperaturen omvandlades till ett mjukt elastiskt substrat. Drogen registrerades och godkändes för användning i flera europeiska länder som ett implanterbart läkemedel som heter Zyderm Collagen Implantant. Detta läkemedel var det första implantatet. Senare såg andra agenter för konturplaster, såsom restylan, perlen, farmakrylgel, artekol, biopolymergel och andra. Dessa läkemedel började användas inte bara för konturmodellering och korrigering av åldersrelaterade förändringar i huden utan också för behandling, eller snarare, för att utjämna lindring av ärr. Alla av dem injicerades i underlivets botten.

Sök efter bättre behandlingar hypotrophic ärr ledde oss till idén att använda för detta ändamål en artificiellt skapade hud motsvarighet - "dermal likvärdig" (DE), som också använt en flytande kollagen. Varianter av artificiell hud substitut var många, men idén om totalt - att skapa de strukturella komponenterna i dermis liknar huden vävnad, vilket inte skulle avvisas vid transplantationer och hade en bra substrat för groning av sina egna komponenter i dermis och epidermis. Det är känt att de grundläggande strukturella komponenterna i dermis är cellulära, fibrösa element och interstitiell substans. Fiberelement är huvudsakligen kollagen och elastinfibrer, interstitiell substans - glykoproteiner, proteoglykaner och glykosaminoglykaner. Det huvudsakliga funktionella cellulära elementet i dermis är fibroblast, den cellulära populationen av fibroblaster är källan till nästan alla strukturella komponenter i dermis. Därför använder de flesta forskare ett kollagen substrat blandat med fibroblaster och glykosaminoglykaner när de skapar ett "hudutbyte". Ovan i en form eller ett annat skikt av keratinocyter anbringas på skapa polnosloynoy hud och snabbare återställa livskraft den transplanterade huden motsvarande, vilket underlättas av många keratinocyter utsöndrade tillväxtfaktorer. En av de första varianterna av "levande ekvivalenten av huden" föreslog 1983 av E.Bell och medförfattare. Hudfibroblaster blandades med kollagen, plasma och tillväxtmedium, vilket ledde till bildningen av en gel på ytan av vilken keratinocyter odlades. Allt detta odlades under 1 -2 veckor i vilro, varefter den dermala ekvivalenten ansågs mogen och var en livskraftig vävnad i form av en genomskinlig elastisk massa. Författarna föreslog att överföra hudens hela skiktstruktur till sårytorna hos bränna patienter. Som en grund för dermal ekvivalent, har vissa författare använt kollagensvamp eller en kollagenmatris, täckt proteoglykaner och befolkade med fibroblaster, odlas ovanpå vilka autologa keratinocyter. Som ett resultat skapades den så kallade tredimensionella hudmodellen. För odling av keratinocyter för efterföljande överföra dem till sårytan, har vissa författare också använts som ett artificiellt substrat matris av kollagen och glykosaminoglykaner kitosan kadaverhud, svinhud. 7-14 dagar efter kulturs början transplanterades ett fullblåst transplantat innehållande dermis och epidermis till sår hos patienter eller djur.

Det konstgjorda hudutbytet användes inte bara för att återställa brännskinnan, utan också för att testa droger för cytotoxicitet för att studera tillväxtfaktorer in vitro.

Otillräcklig, enligt vår synpunkt operativa effektiviteten dermabrasion djupa hypotrophic ärr i kombination med överföring IPC gav tillfälle försöka rikta huden topografi genom inokulering urtagningen hypotrophic ärr analoga dermal ekvivalent. Substratet för skapandet av en dermalekvivalent var flytande kollagen, erhållen genom en laboratorieväg, där en suspension av fibroblaster infördes. Den dermala motsvarande, samt IPC, skapad av ett specialiserat laboratorium certifierat för denna verksamhet och vid datum och klockslag operation levererades i en glasflaska i en behållare med is till kliniken.

Operativa sliprepor som utförs på vanligt sätt efter antiseptisk behandling av huden, och lokalbedövning 2% lidokain eller novokain eller artikain. Vid slipning nivellerades ytan av buken och samtidigt skapades betingelser för engrafting odlade celler eller cellkompositioner. Efter det kylda flytande kollagengel inokulerades med fibroblaster det applicerades med en steril spatel på en polerad yta av hypotrophic ärr (ärr i urtaget), där det är under inflytande av polymerisationstemperaturen av kroppen.

Som ett resultat, efter 5-10 minuter polymeriserades kollagen med flytande fibroblaster i ett tjockt gelstillstånd. Efter förtjockning DE applicerades ett bandage med en suspension eller IPC på substratet ovanifrån.

Ett flerskikts sterilt förband fixerades som vid transplantationen av IPC. Beroende på ytan, var sårförbandet, på vilket keratinocyterna var belägna och typen av slipning, sönderkopplades bandaget inom 7 till 12 dagar.

Metoder för kombinationsbehandling hypotrophic ärr som använder operativa dermabrasion, följt av överföring i en urtagning vommen "dermal ekvivalent" och keratinocyter i en flerskiktsbehållare som odlas på speciella lindade beläggningar eller som en suspension, kan uppnå betydligt bättre kosmetiskt godtagbara resultat med en minskning eller fullständigt försvinnande av ( -) tyg. Dermalekvivalenten bildar sin egen vävnad (dermis), ärrvävnaden förblir under den nybildade vävnaden. IPC skapar en normal tjocklek och funktionell aktivitet av epidermis, på grund av vilket det allmänna utseendet på ärret inom några månader har en tendens till en signifikant förbättring.

Sådan taktik för behandling av hypotropa ärr för närvarande kan kallas optimal för att lösa detta problem. Emellertid är den DE-version som används av oss i form av en kollagengel med fibroblaster inokulerade i den inte särskilt bekväm i arbetet. DE för arbete med hypotropa ärr bör i början vara tjockare, så att det kan placeras i ärgens fördjupning, distribuera det. Varefter det övre såret sår med keratinocyter. Således kan det sägas att denna riktning i arbetet med hypotropa ärr bara är planerad, men prognoserna för dess vidare utveckling och studie är mycket optimistiska.

Komplexitet och hög kostnad för att erhålla flera lager av keratinocyter, som ett terapeutiskt material, stimulerade behovet av att söka efter andra varianter av cellulära kompositioner. Av stort intresse är forskarna odlings fibroblaster som när transplantation till sårytan har effekten, i många avseenden liknar resultaten av transplantation av keratinocyter, men är mycket mer enkelt och billigt cellmaterial. I våra studier genomförde vi flera patienter med hypotropa ärr genom mesoterapi med hjälp av en suspension av fibroblaster för ärrbildning.

Suspension av fibroblaster i ett tillväxtmedium med 1,5-2 miljoner celler per ml. Administrerades under ärr genom mesoterapi tekniker (mikropapulmonal, infiltrativ). Antal behandlingssessioner från 4 till 10, beroende på tidsbegränsning av buken, patientens ålder och felets djup. Intervallet mellan sessionerna är 7-10 dagar. I allmänhet åtföljdes introduktionen av en suspension av autologa och allogena fibroblaster av en liten, snabbflytande vaskulär reaktion.

Som ett resultat, visade kliniska studier som under påverkan av transplanterad IPC minskar varaktigheten av den inflammatoriska responsen i huden och ärr efter dermabrasion operativa och acceleration av epitelisering av sårytor i genomsnitt 3-4 dagar.

När man arbetar med normotrofa och hypertrofa ärr är accelerationen av läkning av postoperativa erosioner av största vikt, eftersom det här ligger möjligheten att erhålla den optimala terapeutiska effekten.

Transplantation av dermalekvivalenten resulterade i fyllning av (-) vävnad av hypotropa ärr, anpassning av deras lättnad, utjämning med den omgivande huden, vilket gjorde området för ärr mycket mindre.

Införandet av en suspension av fibroblaster i hypotropa ärr ledde också till utjämning av lindring av huden och en minskning av ärrområdet.

I alla fall av transplantation av cellulärt material noterades effekten av efterverkan, när det i flera månader uppstod en förbättring av ärrets estetiska utseende, vilket tenderade att bli en dermoidliknande struktur.

Alla effekter som vi observerar är relaterade till realiseringen av den biostimulerande potentialen av transplanterade celler. Det är inte minst rollen som vi ser är att antalet celllager i transplantationer är vanligtvis 10-30% större. Följaktligen är den totala cellpotentialen per enhetarea redan 10-30% högre än normalt. Dessutom erhölls de bästa resultaten i transplantationen av keratinocyter och fibroblaster genom att transplantera det cellulära materialet från unga friska människor. Detta faktum, förresten, talar för att använda den allogena kulturen som erhålls från unga och friska givare. Den bioenergetiska och informativa potentialen hos en sådan kultur överförs till sina egna celler, ibland mycket unga mottagare, vilket förbättrar "kvaliteten" av sina egna vävnader och celler.

Således tillåter appliceringen av keratinocyter och fibroblaster odling:

• Snabba epitelisering av ärr efter dermabrasion.
• Minska utseendet på ärr, inte bara på grund av att ytan har anpassats med ytan av den omgivande huden, men också på grund av att en full epidermis bildas över dem.
• För att förbättra resultaten av operativ dermabrasion på grund av effekten av cytokiner av transplanterade celler på ärret, som i slutändan tenderar att omvandlas till en dermalliknande struktur.
• För att erhålla estetiskt mycket mer acceptabla resultat av behandling av patienter med normotrofa, hypotrofa, hypertrofa, atrofiska ärr och striae.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9], [10], [11]